CACO-2-LUC-RFP細胞
| 參考價 | ￥ 6500 |
| 訂貨量 | ≥1瓶 |
- 公司名稱 上海信裕生物科技有限公司
- 品牌 信裕生物
- 型號
- 產地 中國/美國/德國
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/4/7 21:06:45
- 訪問次數(shù) 55
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| 純度 | 99.9 | 供貨周期 | 一周 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 1*10^6cells/T25方瓶 | 貨號 | XY-H262LR |
| 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁 | 主要用途 | 僅用于科研 |
CACO-2-LUC-RFP細胞
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | CACO-2-LUC-RFP人結直腸腺癌細胞-紅色熒光蛋白-熒光素酶標記 |
細胞別稱 | CACO-2-LUC-RFP |
商品貨號 | XY-H262LR |
種屬來源 | 人 |
年齡性別 | 男性,；72歲 |
組織來源 | 結腸,；結直腸腺癌 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
背景簡介 | Caco-2細胞分離自直腸原位癌；當長到滿時,，Caco-2細胞表現(xiàn)出特征性的腸上皮細胞分化,。Caco-2細胞表達維甲酸結合蛋白I和維甲酸結合蛋白Ⅱ，并呈角質蛋白陽性,。 |
生物安全等級 | BSL-1 |
細胞規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 |
支原體檢測 | 無 |
基因表達情況 | keratin, retinoic acid binding protein 1, retinol binding protein 2
|
培養(yǎng)基 | DMEM-H+20%FBS+1%P/S |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%, 溫度：37℃ |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 |
細胞篩選：
該細胞為已經穩(wěn)定轉染LUC-RFP的細胞,，隨細胞傳代次數(shù)的增加，其LUC-RFP熒光強度會逐漸減弱,。若實驗要求需要維持熒光強度,，可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。
細胞經過20μg/ml嘌呤霉素篩選，平時培養(yǎng)可維持10μg/ml嘌呤霉素
二,、細胞培養(yǎng)操作
1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000 rpm條件下離心3 min,，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中,，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第三天換液并檢查細胞密度,。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
a,、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，使消化液浸潤所有細胞,，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化,。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,，1000 rpm離心5 min，棄去上清液,，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻,。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為例,；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,，裝入無菌離心管中,，1000 rpm條件下離心4 min,，棄去上清液，用PBS清洗一遍,，棄盡PBS,，進行細胞計數(shù)。
b,、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻,，每支凍存管凍存1mL細胞懸液,，注意凍存管做好標識。
c,、將凍存管放入-80℃冰箱,，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
三,、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關信息,，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需 細胞因子等,，確保細胞培養(yǎng)條件一致,，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔,。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,，是正常現(xiàn)象,。觀察好細胞狀態(tài)后,，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,，懸浮細胞直接混勻收集細胞,，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng),。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通 交流,。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，告知細胞 的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用,。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議 1：2 傳代 ,。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿,。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個 10cm 皿。
僅用于科研,，不能用于臨床診斷,！所有產品僅供科研使用，不得用于人或動物的治療等任何其他用途,，不為任何個人提供產品和服務,。以實際收貨產品說明書為準，網站說明書僅供參考,。
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