大家在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候,，想必大家也一定遇到過細(xì)胞狀態(tài)差這種情況,，但是細(xì)胞狀態(tài)差,，有很多種原因造成,？

細(xì)胞狀態(tài)很差，常常出現(xiàn)的現(xiàn)象是：細(xì)胞邊緣不清晰,、細(xì)胞不飽滿,、折光性差、背景比較臟,、黑點(diǎn)很多,、細(xì)胞碎片多（細(xì)胞凋亡后的細(xì)胞碎片）、單個(gè)細(xì)胞內(nèi)有空泡（凋亡）且空泡比較多；如果細(xì)胞出現(xiàn)老化,，也就是細(xì)胞比較扁平,、增殖減緩、細(xì)胞核體積增大,、細(xì)胞突觸變多,，此時(shí)觀察到的細(xì)胞狀態(tài)也是不正常的。所以,，除了考慮血清和細(xì)菌污染的問題,，細(xì)胞老化也不容忽視~

首先，我們要知道什么是細(xì)胞老化,？

研究表明,衰老細(xì)胞的細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜等均有明顯的變化：
①細(xì)胞內(nèi)水分減少,體積變小,新陳代謝速度減慢,；
②細(xì)胞內(nèi)酶的活性降低,；
③細(xì)胞內(nèi)的色素會(huì)積累；
④細(xì)胞內(nèi)呼吸速度減慢,細(xì)胞核體積增大,核膜內(nèi)折,染色質(zhì)收縮,顏色加深.線粒體數(shù)量減少,體積增大,；
⑤細(xì)胞膜通透性功能改變,使物質(zhì)運(yùn)輸功能降低.
形態(tài)變化
總體來說老化細(xì)胞的各種結(jié)構(gòu)呈退行性變化.衰老細(xì)胞的形態(tài)變化表現(xiàn)有：
1,、核：增大、染色深,、核內(nèi)有包含物
2,、染色質(zhì)：凝聚、固縮,、碎裂,、溶解
3,、質(zhì)膜：粘度增加、流動(dòng)性降低
4,、細(xì)胞質(zhì)：色素積聚,、空泡形成
5、線粒體：數(shù)目減少,、體積增大
6,、高爾基體：碎裂
7、尼氏體：消失
8,、包含物：糖原減少,、脂肪積聚
9、核膜：內(nèi)陷
分子水平的變化
1,、DNA：從總體上DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄在細(xì)胞衰老時(shí)均受抑制,但也有個(gè)別基因會(huì)異常激活,端粒DNA丟失,線粒體DNA特異性缺失,DNA氧化,、斷裂、缺失和交聯(lián),甲基化程度降低.
2,、 RNA：mRNA和tRNA含量降低.
3,、蛋白質(zhì)：含成下降,細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)發(fā)生糖基化、氨甲?；?、脫氨基等修飾反應(yīng),導(dǎo)致蛋白質(zhì)穩(wěn)定性、抗原性,可消化性下降,自由基使蛋白質(zhì)肽斷裂,交聯(lián)而變性.氨基酸由左旋變?yōu)橛倚?
4,、 酶分子：活性中心被氧化,金屬離子Ca2+,、Zn2+、Mg2+,、Fe2+等丟失,酶分子的二級(jí)結(jié)構(gòu),溶解度,等電點(diǎn)發(fā)生改變,總的效應(yīng)是酶失活.
5,、脂類：不飽和脂肪酸被氧化,引起膜脂之間或與脂蛋白之間交聯(lián),膜的流動(dòng)性降低.如下圖：

     圖1 HEK293細(xì)胞  

  圖2 MSC細(xì)胞

1. 不要等細(xì)胞長(zhǎng)得太滿才傳代,。細(xì)胞太密會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)下降,，產(chǎn)生細(xì)胞接觸性抑制。

2. 細(xì)胞不要消化過度,。采用胰蛋白酶消化細(xì)胞,，會(huì)造成細(xì)胞表面一定程度的細(xì)胞損傷。

3. 最重要的是使用優(yōu)質(zhì)的血清和培養(yǎng)基：干細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)基中的內(nèi)毒素非常敏感,。除了要留意基礎(chǔ)培養(yǎng)基的內(nèi)毒素外,，也要留意血清的內(nèi)毒素。如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時(shí),，干細(xì)胞很容易老化或死亡,，導(dǎo)致細(xì)胞“亞健康”狀態(tài),，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)受到影響。很多使用者,，在血清在試用前,，就會(huì)通過提早審核該批次《檢測(cè)報(bào)告》，以決定是否入圍進(jìn)行試用,。

4. 在開始養(yǎng)細(xì)胞并傳代時(shí),，也要特別注意凍存細(xì)胞,，以保持細(xì)胞有種子庫存在,，可以有效避免細(xì)胞損傷。

因此應(yīng)挑選內(nèi)毒素低的優(yōu)質(zhì)血清,，如進(jìn)口胎牛血清品牌：Ausgenex,。

一、血清信息

中文：Ausgenex胎牛血清 FBS500-S

品牌：Ausgenex

規(guī)格：500ml/瓶

貨號(hào)：FBS500-S

批號(hào)：見瓶身

儲(chǔ)存溫度：-10℃ to -40℃

二,、產(chǎn)品描述

本胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)是AusgeneX產(chǎn)品(原產(chǎn)品編號(hào)為FBS500-S),，產(chǎn)地澳洲。本胎牛血清不僅適用于常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng),，更適合用于一些要求較高的細(xì)胞的培養(yǎng),。

三、Ausgenex胎牛血清的優(yōu)勢(shì)是：