Karpas422 (人非霍奇金淋巴瘤)
參考價 | ¥ 4000 |
訂貨量 | ≥1瓶 |
- 公司名稱 上海信裕生物科技有限公司
- 品牌 信裕生物
- 型號
- 產(chǎn)地 中國/美國/德國
- 廠商性質 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/4/10 16:50:37
- 訪問次數(shù) 50
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純度 | 99.9 | 供貨周期 | 一周 |
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規(guī)格 | 1*10^6cells/T25方瓶 | 貨號 | XY-H778 |
應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁 | 主要用途 | 僅用于科研 |
Karpas422 (人非霍奇金淋巴瘤)
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 人非霍奇金淋巴瘤Karpas422 |
細胞別稱 | Karpas422 |
商品貨號 | XY-H778 |
種屬來源 | 人 |
年齡性別 | 73歲/女 |
組織來源 | 肺 |
生長特性 | 懸浮生長 |
生物安全等級 | 1 |
細胞規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 |
支原體檢測 | 無 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃ |
二,、細胞培養(yǎng)操作
1) 復蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000 rpm條件下離心3 min,,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6 cm皿中,,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第三天換液并檢查細胞密度,。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
a,、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,,用PBS清洗細胞一次,;
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,,倒置顯微鏡下觀察,,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,,然后將懸液轉移至15ml離心管中,,1000rpm離心5min;
c,、棄上清,,沉淀細胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,,最后放入37℃,,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
d,、待細胞貼壁后,,觀察培養(yǎng)結果,之后進行換液培養(yǎng)或傳代,。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例,;
a,、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,,用PBS清洗細胞一次,;
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,,1000rpm離心5min,;
c、用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,,并放置于凍存管中,;
d,、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉入液氮中進行長期保存,。使用程序降溫盒可直接放入-80℃,。
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系,。
2. 仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需 細胞因子等,,確保細胞培養(yǎng)條件一致,,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由 客戶自行承擔,。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,,是正常現(xiàn)象,。觀察好細胞狀態(tài)后,,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,,懸浮細胞直接混勻收集細胞,,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清,。加 5 mL PBS 重懸細胞,,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng),。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,,記錄細胞狀態(tài),,便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決,。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。 收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿,。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿,。
僅用于科研,不能用于臨床診斷,!所有產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于人或動物的治療等任何其他用途,不為任何個人提供產(chǎn)品和服務,。以實際收貨產(chǎn)品說明書為準,,網(wǎng)站說明書僅供參考。