細胞的活性鑒定在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)上具有很重要的意義,。它是體外細胞培養(yǎng)技術(shù)中常用的一個檢測指標,。不同的細胞活性鑒定方法有各自不同具體的反應(yīng)機理，但無論采用哪種方法,，都利用了死細胞和活細胞在生理機能和性質(zhì)上的差異,。常用的方法有直接染色法，克隆形成試驗,，比色法等,。

比色法便是利用活細胞還原力,，尤其是線粒體中脫氫酶，將底物還原后檢測吸光值的改變來衡量活細胞還原力,。在對細胞還原力的檢測中,，培養(yǎng)液中若存在還原酶類,，例如谷胱干肽S-轉(zhuǎn)移酶（glutathione S-transferase，GST）,，可能會使測定結(jié)果偏離,真實水平偏高,。目前應(yīng)用的底物以刃天青鹽類和四唑鹽類為主，在四唑鹽類的底物中尤其以靈敏度高,、重復(fù)性好,、毒性極低的CCK-8很受歡迎。下面跟小編一起比較一下這兩類底物的優(yōu)缺點吧,！

1. 刃天青（resazurin）

刃天青溶液呈藍色,，通常用作酸堿指示劑（pH3.8橙～6.5深紫）和氧化還原指示劑。在進行細胞活性檢測時,，刃天青可滲入細胞并被活細胞不可逆地還原為粉紅色,，同時有紅色熒光的試鹵靈（resorufin）出現(xiàn)。試鹵靈的吸光值或熒光強度與細胞數(shù)量,、還原能力呈正相關(guān),，因此可通過任一參數(shù)來評估細胞活性。

2.四唑鹽（tetrazolium salts）

四唑鹽（表1）是一種人工合成的雜環(huán)化合物,，它可被活細胞還原生成甲臜（Formazan）,，不同的四唑鹽衍生物作底物會得到不同顏色的甲臜，與試鹵靈一樣,，甲臜的吸光值大小與細胞數(shù)量,、代謝活性呈正相關(guān)，并以此作為細胞活性強弱的指標（圖1）,。

圖1 四唑鹽顯色原理

表1 四唑鹽的類型