TAKARA RR047B 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑 PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)

我們北京云肽生物科技有限公司作為 TAKARA 公司的特約經(jīng)銷商為客戶提供，正規(guī)進(jìn)口,，保證原裝正品,，貨期穩(wěn)定的服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

Takara Bio 中國(guó)有兩家公司——寶生物工程（大連）有限公司和寶日醫(yī)生物技術(shù)（北京有限公司,。寶生物工程（大連）有限公司是 Takara Bio Inc.在中國(guó)的生產(chǎn)基地,，寶日醫(yī)生物技術(shù)（北京）有限公司負(fù)責(zé) Takara Bio Inc.旗下所有品牌在中國(guó)市場(chǎng)的宣傳及銷售。

寶日醫(yī)生物技術(shù)（北京）有限公司成立于 2004 年 1 月,，公司主要銷售生物工程研究用試劑和儀器（包括 Takara,、Clontech、Cellartis 品牌）,，產(chǎn)品主要包括PCR/qPCR,、基因克隆、基因功能研究,、蛋白質(zhì)功能研究,、二代測(cè)序、干細(xì)胞研究等產(chǎn)品及服務(wù),，并可提供客戶定制化服務(wù),。還開展以細(xì)胞治療為中心的生物工程領(lǐng)域的技術(shù)開發(fā)與服務(wù),，銷售細(xì)胞治療和基因治療相關(guān)產(chǎn)品。

TAKARA 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑-常備現(xiàn)貨

TAKARA RR047B 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑 PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)  200次×4

TAKARA RR047B 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑 PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)  200次×4,，產(chǎn)品說明：

為了準(zhǔn)確地進(jìn)行基因表達(dá)量分析,，必須滿足只有cDNA作為模板檢出的先決條件，但Total RNA中常?；煊谢蚪MDNA,，并可以直接作為PCR反應(yīng)的模板進(jìn)行擴(kuò)增，因此會(huì)造成解析結(jié)果不準(zhǔn)確,。為了避免這種情況發(fā)生,，通常將檢測(cè)用引物設(shè)計(jì)在內(nèi)含子前后的外顯子上，使基因組DNA得不到擴(kuò)增,。但是,，此方法不適合具有單個(gè)外顯子的基因或兩個(gè)外顯子之間所跨的內(nèi)含子過小的基因，同時(shí)當(dāng)基因組上有偽基因存在時(shí),、或設(shè)計(jì)引物對(duì)基因組有非特異性擴(kuò)增時(shí),、以及基因信息沒被wan全解析的生物種等也同樣不適合于本方法。在這種情況下,，我們常常需要對(duì)Total RNA樣品進(jìn)行DNase I處理,，以除去殘存的基因組DNA。而DNase I處理通常要進(jìn)行復(fù)雜的純化操作,，同時(shí)會(huì)造成RNA的降解和損失,。

PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因組DNA進(jìn)行Real Time RT-PCR反應(yīng)的專用反轉(zhuǎn)錄試劑。Kit中使用了具有較強(qiáng)DNA分解活性的gDNA Eraser,，通過42℃,，2 min即可除去基因組DNA。同時(shí)由于反轉(zhuǎn)錄試劑中含有抑制DNA分解酶活性的組分,，經(jīng)過gDNA Eraser處理后的樣品可以直接進(jìn)行15 min的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成cDNA,，因此，20 min內(nèi)即可迅速完成從基因組DNA去除到cDNA合成的全過程,。

使用本制品合成的cDNA適用于嵌合法和探針法qPCR分析,，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模x擇與TB Green® Premix Ex Taq™ II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B)*,、TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420A/B)*,、Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 組合使用。

*：Takara嵌合法Real Time PCR（qPCR）產(chǎn)品的名稱從2017年12月下旬開始,，將逐步變更為「TB Green系列」,。產(chǎn)品Code、性能和原有產(chǎn)品相比沒有變化,，請(qǐng)繼續(xù)放心使用,。

產(chǎn)品名稱將隨新lot的產(chǎn)品逐步變更,，產(chǎn)品網(wǎng)頁(yè)或操作說明書可能會(huì)先于產(chǎn)品標(biāo)簽變更，望知悉,！

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-20℃,。

試劑盒特長(zhǎng)

1. 含有去除基因組DNA的gDNA Eraser，只需2 min即可除去基因組DNA,。

2. 只需15 min即可高效合成Real Time PCR反應(yīng)用模板cDNA,，是進(jìn)行2 Step Real Time RT-PCR反應(yīng)的理想試劑。

3. 反轉(zhuǎn)錄引物使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer混合的RT Primer Mix,，可以均勻合成樣品中的各種cDNA,。

4. 本制品提供了TB Green qPCR分析法和探針qPCR分析法各自適合的反應(yīng)體系，可以根據(jù)分析方法選擇體系,。

TB Green qPCR分析法和探針qPCR分析法區(qū)別如下：

(1) 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中RT Primer Mix的用量,。

(2) 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中總RNA的用量。

5. Real Time RT PCR定量需要建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的條件就是需要將總RNA和反轉(zhuǎn)錄cDNA稀釋到較低的濃度,。如果用水或TE Buffer稀釋時(shí)，由于模板濃度低不穩(wěn)定,，因而會(huì)縮小曲線范圍，結(jié)果準(zhǔn)確度降低,。本制品中附加了標(biāo)準(zhǔn)曲線制作用稀釋液EASY Dilution (for Real Time PCR) ,，將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時(shí)也能夠進(jìn)行準(zhǔn)確稀釋，容易在寬廣范圍內(nèi)獲得準(zhǔn)確定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。

注意事項(xiàng)

1．使用本制品合成的cDNA與TB Green關(guān)聯(lián)制品組合使用時(shí),，建議使用：

TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No.RR820Q/A/B)

TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B)

以上制品與本制品組合使用，可以得到可信度高的結(jié)果,。

本制品與TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) 組合使用時(shí),，有時(shí)反應(yīng)性能不好，不推薦使用,。

2. 當(dāng)同時(shí)需要進(jìn)行數(shù)次反應(yīng)時(shí),，應(yīng)先配制各種試劑的混合液 (Master Mix；其中包括RNase Free dH2O,、Buffer,、酶等)，然后再分裝到每個(gè)反應(yīng)管中,。這樣可使所取的試劑體積更準(zhǔn)確,，減少試劑損失，避免重復(fù)分取同一試劑,。同時(shí)也可以減少實(shí)驗(yàn)操作或?qū)嶒?yàn)之間產(chǎn)生的誤差,。

3. gDNA Eraser和PrimeScript RT Enzyme Mix I 在使用前要小心地離心收集到反應(yīng)管底部,。由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高,，分取時(shí)應(yīng)慢慢吸取,。同時(shí)，要使用精確,、量程適合的移液槍,，并且不要使Tip插入液面過深，否則會(huì)因Tip壁粘著造成損失,，而使酶量不足,。

4. 5X gDNA Eraser Buffer和5X PrimeScript Buffer 2（for Real Time）在使用前需Vortex振蕩混勻，輕輕離心后使用,。

5. 分裝試劑時(shí)務(wù)必使用新的槍頭 (Tip),，以防止樣品間污染。

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