土壤幾丁質(zhì)酶（Soil Chitinase,，S-Chitinase）試劑盒說明書

分光光度法 50 管/24 樣

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：

幾丁質(zhì)主要存在于蝦、蟹,、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨),，以及真菌類的細(xì)胞壁中，而幾丁質(zhì)酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質(zhì)水解,，具有抵御真菌侵染的作用,，成為抗真菌病害的研究熱點(diǎn)。

測定原理：

幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖,，進(jìn)一步與對二甲氨基苯甲醛產(chǎn)生紅色化合物,，在 585nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性,。

試劑組成和配制：

自備儀器和用品：

天平,、水浴鍋、離心機(jī),、震蕩儀,、可見分光光度計(jì)、1 ml 玻璃比色皿,，甲苯,、蒸餾水。

樣品處理：

新鮮土樣風(fēng)干,，過 30-50 目篩,。

測定操作表：

計(jì)算公式：

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=5.2714x-0.0007，R²=0.9989,；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/ml）,，y 為吸光值ΔA。

酶活性定義：37℃條件下,，每克土壤每天分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生 1μg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活性單位,。

土壤幾丁質(zhì)酶活性（μg/d/g 土樣）=（ΔA +0.0007）÷5.2714×V 反總÷W÷T×1000= 598×（ΔA +0.0007） V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.63ml,；W：樣本質(zhì)量,，0.2g；T：反應(yīng)時間,，1d,；1000：1mg/ml=1000μg/ml

注意事項(xiàng)：

試劑一充分混勻后再使用。