植物原花青素（Oligomeric Proantho Cyanidins, OPC）試劑盒說明書

微量法 100T/48S

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

原花青素（Oligomeric Proantho Cyanidins,，OPC）是一類黃烷醇單體及其聚合體的多酚化合物,，廣泛存在于植物的各種器官中,，具有ji強的抗氧化性和清除自由基的作用,，廣泛的應用于醫(yī)藥,，食品,，化妝品,，保健品行業(yè),。

測定原理：

在酸性條件下,，植物原花青素 A 環(huán)上的間苯二酚和間苯san酚與香草醛發(fā)生縮合反應，產(chǎn)生有色化合物,，在 500nm 處有特征吸收峰,，測定 500nm 光吸收值可計算原花青素的含量。

組成：

試劑二：粉劑 0.1g×1 瓶,，4℃避光保存,，臨用前加 10ml 甲醇溶解。測定工作液：臨用前按照用量將試劑一和試劑二按照 1:1 混合,。

空白工作液：臨用前按照用量將試劑一和甲醇按照 1:1 混合,。

自備儀器和用品：

天平、常溫離心機,、可見分光光度計/酶標儀,、微量石英比色皿/96 孔板、蒸餾水,、鹽酸,、無水乙醇和甲醇。

OPC 提?。?/span>

稱取約 0.1g 樣本，加入 2ml 提取液,，勻漿后,，60℃振蕩提取 2h， 10000g,，25℃,，離心 10min，取上清待測,。

測定操作表

1,、分光光度計/酶標儀預熱 30min，調(diào)節(jié)波長至 500nm,，蒸餾水調(diào)零,。

2、操作表

OPC 計算公式：

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下標準曲線：y=0.0194x+0.0006，R²=0.999

OPC 含量（mg/g 鮮重）= (ΔA-0.0006）÷0.0194×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)×10^-3

= 0.515×(ΔA-0.0006）÷W

V 樣總：加入提取液體積,，2ml,； V 反總：反應總體積，0.2ml,；V 樣：反應中樣品體積,，0.04ml；W：樣品質(zhì)量,，g

b. 用 96 孔板測定的計算公式如下

標準曲線：y=0.0097x+0.0006,，R²=0.999

OPC 含量（mg/g 鮮重）= (ΔA-0.0006）÷0.0097×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)×10^-3

= 1.03×(ΔA-0.0006）÷W

V 樣總：加入提取液體積，2ml； V 反總：反應總體積,，0.2ml,；V 樣：反應中樣品體積，0.04ml,；W：樣品質(zhì)量,，g

注意事項：

1、配制好的試劑二應盡快使用,，4℃保存時間不超過一個月,。

2、吸光度變化應該控制在 0.01～0.8 之間,。否則加大樣品量或稀釋樣品,，注意計算公式中參與計算的稀釋倍數(shù)要相應改變。

3,、*低檢出限為 10μg/g,。