化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>行業(yè)專用試劑>生化與分子生物學(xué)用試劑>abs60322 Lipofect5000 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑
abs60322 Lipofect5000 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑
| 參考價(jià) | ￥ 900 |
| 訂貨量 | ≥1份 |
- 公司名稱 愛(ài)必信（上海）生物科技有限公司
- 品牌 absin
- 型號(hào) abs60322
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/2/8 15:33:41
- 訪問(wèn)次數(shù) 1395
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生化試劑,，分子生物學(xué)試劑,，血清，細(xì)胞培養(yǎng)試劑,，化學(xué)試劑,，免疫學(xué)試劑，耗材,，儀器,，定制服務(wù)
| CAS | - | 純度 | - |
|---|---|---|---|
| 分子量 | - | 分子式 | - |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 0.5ml；1.0ml |
| 貨號(hào) | abs60322 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 適用于將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染入哺乳動(dòng)物細(xì)胞 |
產(chǎn)品描述：
Lipofect5000是在研究了國(guó)外同類產(chǎn)品性能的基礎(chǔ)上開發(fā)的一款高性能通用型核酸轉(zhuǎn)染試劑,，適用于將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染入哺乳動(dòng)物細(xì)胞,。Lipofect5000具有非常優(yōu)異的轉(zhuǎn)染性能，可轉(zhuǎn)染絕大多數(shù)貼壁細(xì)胞和部分懸浮細(xì)胞,。在貼壁培養(yǎng)的AAV293細(xì)胞中,，Lipofect5000質(zhì)粒DNA（EGFP質(zhì)粒）的轉(zhuǎn)染陽(yáng)性率可高達(dá)90%以上,，即使對(duì)于較難轉(zhuǎn)染的RAW264.7細(xì)胞，Lipofect5000的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染陽(yáng)性率也可高達(dá)70%,。與部分國(guó)際品牌相比,，Lipofect5000擁有更高的DNA轉(zhuǎn)染性能，價(jià)格也親和,，是進(jìn)行DNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的理想選擇,。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1、可高效轉(zhuǎn)染多種貼壁細(xì)胞和部分懸浮細(xì)胞等,，在貼壁細(xì)胞中的轉(zhuǎn)染陽(yáng)性率可高達(dá)90%以上,。
2、 顯著的性價(jià)比優(yōu)勢(shì),，轉(zhuǎn)染性能顯著優(yōu)于部分國(guó)際品牌而價(jià)格不足其30%,。
產(chǎn)品組分：
Lipofect5000 | Trans buffer |
0.5ml | 25ml |
1ml | 50ml |
應(yīng)用：
適用細(xì)胞系：HeLa,Huh-7，CCD-14Br,，SBC-1,A-172,，NB-1,COS-7,293T,人肝細(xì)胞，原代大鼠肝細(xì)胞,，雞胚胎心肌細(xì)胞等,。
貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法步驟（以24孔板轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA為例）:
A、細(xì)胞接種：
1,、 轉(zhuǎn)染前一天將細(xì)胞鋪板（使用不含抗生素的培養(yǎng)基）,，每孔1.5-2.0×105個(gè)細(xì)胞左右，使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度為80%,；
2,、最好在轉(zhuǎn)染開始之前更換新鮮的含血清培養(yǎng)基，以防轉(zhuǎn)染后孵育階段細(xì)胞密度太大,、營(yíng)養(yǎng)不足導(dǎo)致細(xì)胞死亡,。
B、Lipofect5000/DNA復(fù)合物包裝（該步完成后應(yīng)立即進(jìn)行轉(zhuǎn)染）：
1,、在1.5ml無(wú)菌離心管中加入50ul Trans buffer,，并添加適量的DNA（參見(jiàn)附表），用移液器輕輕混勻成DNA稀釋液,。
2,、使用前混勻轉(zhuǎn)染試劑，立即往DNA稀釋液中添加適量的轉(zhuǎn)染試劑,，用移液器輕輕混勻,。
3、將Lipofect5000/DNA混合物室溫靜置15分鐘后,，立即轉(zhuǎn)染,。
注意：離心管最好使用聚丙烯離心管,。
C、轉(zhuǎn)染：
1,、將步驟B制備的復(fù)合物滴加至細(xì)胞培養(yǎng)孔中,。輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)板以使復(fù)合物均勻分布。
2,、 培養(yǎng)24小時(shí)后即可觀察,，但最佳觀察時(shí)間為36小時(shí)。如果需要,，細(xì)胞培養(yǎng)6-24小時(shí)后可以更換新鮮培養(yǎng)基,，但不是必須。
3,、 收獲細(xì)胞，進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),。對(duì)于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,，在轉(zhuǎn)染24-48小時(shí)后，用選擇培養(yǎng)基傳代培養(yǎng),。
儲(chǔ)存/保存方法：
4-8°C 保存,，有效期一年，使用前請(qǐng)輕輕混勻,。
技術(shù)指標(biāo)：
附 貼壁細(xì)胞培養(yǎng)體系推薦初始轉(zhuǎn)染條件：
培養(yǎng)皿 | 96 | 48 | 24 | 12 | 6 | 10cm 皿 | |
表面積(cm2) | 0.35 | 1.0 | 1.9 | 3.8 | 9.6 | 59 | |
復(fù)合物包裝Trans buffer,、試劑、DNA量 | Trans buffer(ul) | 10 | 25 | 50 | 100 | 200 | 1000 |
Lipofect5000 (ul) | 0.25 | 0.5 | 1.2 | 2.4 | 4.8 | 24 | |
1ug/ul plasmid (ul) | 0.15 | 0.3 | 0.8 | 1.5 | 3 | 15 | |
培養(yǎng)基(ml) | 0.1 | 0.25 | 0.5 | 1 | 2 | 10 | |
注意事項(xiàng)：
1,、剛開始使用,，建議進(jìn)行細(xì)胞密度優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，如可在培養(yǎng)板中分別接種1.5×105,、2.0×105,、2.5×105個(gè)細(xì)胞，分別進(jìn)行DNA轉(zhuǎn)染,，以選擇出轉(zhuǎn)染效果較好的細(xì)胞接種密度,。
2、應(yīng)避免轉(zhuǎn)染復(fù)合物中存在血清,，因?yàn)檠鍟?huì)干擾轉(zhuǎn)試劑與DNA形成復(fù)合物,，在轉(zhuǎn)染過(guò)程中不要向培養(yǎng)基中添加抗生素。
溫馨提示：本產(chǎn)品僅作科研實(shí)驗(yàn)使用,，不支持臨床等研究
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