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abs60255 質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染試劑盒(貼壁細(xì)胞)
參考價 | ¥ 1728 |
訂貨量 | ≥1份 |
- 公司名稱 愛必信(上海)生物科技有限公司
- 品牌 absin
- 型號 abs60255
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/2/8 15:29:17
- 訪問次數(shù) 1297
質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染試劑盒質(zhì)粒DNA質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染試劑盒試劑盒
聯(lián)系方式:愛必信021-38015121 查看聯(lián)系方式
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CAS | - | 純度 | - |
---|---|---|---|
分子量 | - | 分子式 | - |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 0.5ml;1.0ml,;1.5ml |
貨號 | abs60255 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 專門用于質(zhì)粒DNA細(xì)胞轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染試劑 |
產(chǎn)品介紹:
這款產(chǎn)品是在DeofectEU Transfection Reagent的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化研發(fā)成功的專門用于質(zhì)粒DNA細(xì)胞轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染試劑,。它具有非常好的轉(zhuǎn)染性能,可高效轉(zhuǎn)染多種貼壁細(xì)胞,、原代細(xì)胞和懸浮細(xì)胞,,轉(zhuǎn)染效率在貼壁細(xì)胞中高達(dá)90%以上(EGFP質(zhì)粒)。與目前市場上常見的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑不同,,它采用生物可降解材料配制,,對細(xì)胞的毒性很低,轉(zhuǎn)染后細(xì)胞死亡率不到10%,。這款產(chǎn)品使用也非常方便,,先將轉(zhuǎn)染試劑與質(zhì)粒DNA混合,,再將轉(zhuǎn)染試劑-DNA復(fù)合物直接加入培養(yǎng)細(xì)胞中,血清不影響其轉(zhuǎn)染效果,,不必刻意添加或更換培養(yǎng)液,,操作十分簡便。
產(chǎn)品特點:
1,、強(qiáng)大的細(xì)胞轉(zhuǎn)染性能:可高效轉(zhuǎn)染多種貼壁細(xì)胞,、原代細(xì)胞和懸浮細(xì)胞,轉(zhuǎn)染效率在貼壁細(xì)胞中高達(dá)90%以上,;
2,、極低的細(xì)胞毒性:使用可降解生物材料,細(xì)胞毒性低,,轉(zhuǎn)染細(xì)胞死亡率不到10%,,大大降低了因細(xì)胞毒性對實驗結(jié)果的影響,實驗結(jié)果更為客觀,;
3,、操作簡便,可用于含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,,轉(zhuǎn)染前后不需要更換培養(yǎng)液,。
試劑盒包裝 | ||
貨 號 | R試劑 | Trans buffer |
abs60255-0.5ml | 0.5ml | 20ml |
abs60255-1.0ml | 1.0ml | 40ml |
abs60255-1.5ml | 1.5ml | 60ml |
方法步驟(以24孔板轉(zhuǎn)染為例):
A、細(xì)胞接種:
1,、轉(zhuǎn)染前24小時左右對細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)接,,培養(yǎng)過夜。
2,、確保轉(zhuǎn)染時細(xì)胞密度為90%左右,。
3、最好在轉(zhuǎn)染開始之前更換新鮮的含血清培養(yǎng)基,,以防轉(zhuǎn)染后孵育階段細(xì)胞密度太大,、營養(yǎng)不足導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
B,、R /DNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備(該步完成后應(yīng)立即進(jìn)行轉(zhuǎn)染):
1,、在1.5ml無菌離心管中加入50ul Trans buffer,再加入適量的轉(zhuǎn)染試劑,,見附表,。用移液器輕輕混勻后在室溫靜置5分鐘。
2,、在1.5ml無菌離心管中加入50ul Trans buffer,,再加入適量的DNA,見附表,。用移液器再次輕輕混勻后在室溫靜置5分鐘,。
3,、將DNA-Trans buffer混合物滴加至R-Trans buffer混合物中,用移液器輕輕混勻后在室溫靜置15-20分鐘后,,立即轉(zhuǎn)染,。
注意: R-Trans buffer混合物和DNA-Trans buffer混合物的混合順序非常重要,切勿顛倒,。注意:離心管最好使用聚丙烯離心管,。
C、轉(zhuǎn)染:
1,、將步驟B制備的轉(zhuǎn)染復(fù)合物滴加至培養(yǎng)基中,,邊加邊輕輕晃動培養(yǎng)板以使復(fù)合物均勻分布。加完后,,立即將培養(yǎng)板轉(zhuǎn)入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
2,、培養(yǎng)12小時后即可觀察,,最佳觀察或收獲時間為24-48小時。
3,、R在培養(yǎng)基中仍有較高的轉(zhuǎn)染效率,,因此轉(zhuǎn)染前后不需要換成無血清或低血清培養(yǎng)基。如果轉(zhuǎn)染后需要更換新鮮培養(yǎng)基,,請于加入R/DNA復(fù)合物12-24小時后進(jìn)行,。
儲存/保存方法:
-20℃避光保存,Trans buffer 可保存于2-8°C,,有效期1年,,使用前輕輕混勻。
技術(shù)指標(biāo):
附表:不同培養(yǎng)體系推薦初始轉(zhuǎn)染條件
培養(yǎng)皿 | 96 孔板 | 48 孔板 | 24 孔板 | 12 孔板 | 6 孔板 | 10cm 皿 | |
表面積cm2 | 0.35 | 1.0 | 1.9 | 3.8 | 9.6 | 59 | |
Trans buffer,、試劑,、DNA 量 | Trans buffer(ul) | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 | 2000 |
R (ul) | 0.5 | 1.3 | 2.5 | 5.0 | 10 | 50 | |
1μg/μl plasmid (ul) | 0.16 | 0.4 | 0.8 | 1.6 | 3.2 | 16 | |
培養(yǎng)基(ml) | 0.10 | 0.25 | 0.50 | 1.0 | 2.0 | 10 |
產(chǎn)品用途:
適用細(xì)胞系:293T,A549,,B16F10,,HEK 293,HeLa,,Hepa 1-6,,Hepa 1cLc7,HepG2,,BHK-21,,BNL.CL2,BRL-3A,,C2C12,,C6,,CHO-K1,Clone 9,,COS-1,,COS-7,Daoy,,DBTRG-05MG,,DI-TNC1,DU 145,,HLF-a,,Huh-7,K562,,KB,,KLN 205,Lυ2 (LLC1),,NCaP-FGC,,MCF-7,MEL,,Neuro-2a,,NIH3T3,OVCAR3,, PC3,,PC-12等。
注意事項:
1,、轉(zhuǎn)染前的細(xì)胞匯合度以90%左右為宜,,轉(zhuǎn)染時細(xì)胞生長狀態(tài)應(yīng)保持良好,不要有支原體污染,。
2,、剛開始轉(zhuǎn)染,建議進(jìn)行優(yōu)化實驗,,如24孔培養(yǎng)板,,每孔質(zhì)粒用量 0.8ug,轉(zhuǎn)染試劑用量可選擇2.0ul,、2.5ul,、3.0ul、3.5ul進(jìn)行優(yōu)化,。
3,、應(yīng)避免轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備體系中存在血清,因血清會干擾R與 DNA形成復(fù)合物,培養(yǎng)基中盡量不要使用抗生素,。
4,、如果需要穩(wěn)轉(zhuǎn),請在轉(zhuǎn)染24-48小時后加入篩選培養(yǎng)基,。
5,、本試劑盒主要用于質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染,如需質(zhì)粒DNA,、RNA,、siRNA均可轉(zhuǎn)染的試劑,請選擇核酸轉(zhuǎn)染試劑盒(#abs60259),。