化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>行業(yè)專用試劑>生化與分子生物學(xué)用試劑>abs60256 PM原代細(xì)胞質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染試劑盒
abs60256 PM原代細(xì)胞質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染試劑盒
參考價(jià) | ¥ 528 |
訂貨量 | ≥1份 |
- 公司名稱 愛必信(上海)生物科技有限公司
- 品牌 absin
- 型號(hào) abs60256
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/3/26 14:46:03
- 訪問次數(shù) 1390
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生化試劑,分子生物學(xué)試劑,,血清,,細(xì)胞培養(yǎng)試劑,化學(xué)試劑,,免疫學(xué)試劑,,耗材,儀器,,定制服務(wù)
CAS | - | 純度 | - |
---|---|---|---|
分子量 | - | 分子式 | - |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 0.1ml;0.5ml;1.0ml;1.5ml |
貨號(hào) | abs60256 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 專門用于原代細(xì)胞質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染試劑 |
產(chǎn)品介紹:
這款產(chǎn)品是在Plasmid DNA Transfection Reagent的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化研發(fā)成功的專門用于原代細(xì)胞質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染試劑,。它具有非常好的轉(zhuǎn)染性能,可高效轉(zhuǎn)染多種原代細(xì)胞,,轉(zhuǎn)染效率高達(dá)70%以上(EGFP質(zhì)粒),。與目前市場(chǎng)上常見的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑不同,這款產(chǎn)品采用生物可降解材料配制,,對(duì)細(xì)胞的毒性很低,,轉(zhuǎn)染后細(xì)胞死亡率不到10%。使用也非常方便,,先將轉(zhuǎn)染試劑與質(zhì)粒DNA混合,,再將轉(zhuǎn)染試劑-DNA復(fù)合物直接加入培養(yǎng)細(xì)胞中,血清不影響其轉(zhuǎn)染效果,,不必刻意添加或更換培養(yǎng)液,,操作十分簡(jiǎn)便。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1,、強(qiáng)大的細(xì)胞轉(zhuǎn)染性能:可高效轉(zhuǎn)染多種原代細(xì)胞,,轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)85%以上;
2,、 極低的細(xì)胞毒性:使用可降解生物材料,,細(xì)胞毒性低,轉(zhuǎn)染細(xì)胞死亡率不到10%,,大大降低了因細(xì)胞毒性對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,,實(shí)驗(yàn)結(jié)果更為客觀,;
3、操作簡(jiǎn)便,,可用于含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,,轉(zhuǎn)染前后不需要更換培養(yǎng)液,。
方法步驟(以24孔板轉(zhuǎn)染為例):
A,、細(xì)胞接種:
1,、轉(zhuǎn)染前24小時(shí)左右對(duì)細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)接,培養(yǎng)過夜,;
2,、確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度為90%左右,;
3、最好在轉(zhuǎn)染開始之前更換新鮮的含血清培養(yǎng)基,,以防轉(zhuǎn)染后孵育 階段細(xì)胞密度太大,、營(yíng)養(yǎng)不足導(dǎo)致細(xì)胞死亡,。
B、PM /DNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備(該步完成后應(yīng)立即進(jìn)行轉(zhuǎn)染):
1,、在1.5 ml無菌離心管中加入50µl Trans buffer,,再加入適量的轉(zhuǎn)染 試劑,見附表,。用移液器輕輕混勻后在室溫靜置5分鐘,。
2、在1.5 ml無菌離心管中加入50µl Trans buffer,,輕輕混勻,,再加入適量的DNA,,見附表,。用移液器再次輕輕 混勻后在室溫靜置5分鐘。
3,、將DNA-Trans buffer合物滴加至PM-Trans buffer混合物中,,用移液器輕輕混勻后在室溫靜置15~20分后,立即轉(zhuǎn)染,。注意: PM-Trans buffer混合物和DNA-Trans buffer混合物的混合次序非常重要,,切勿顛倒。
注意:離心管最好使用聚丙烯離心管,。
C,、轉(zhuǎn)染:
1、將步驟B制備的轉(zhuǎn)染復(fù)合物滴加至培養(yǎng)基中,,邊加邊輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)板以使復(fù)合物均勻分布,。加完后,立即將培養(yǎng)板轉(zhuǎn)入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
2,、培養(yǎng)12小時(shí)后即可觀察,,最佳觀察或收獲時(shí)間為24~48小時(shí),。
3、PM在培養(yǎng)基中仍有較高的轉(zhuǎn)染效率,,因此轉(zhuǎn)染前后不需要換成無血清或低血清培養(yǎng)基,。如果轉(zhuǎn)染后需要更換新鮮培養(yǎng)基,,請(qǐng)于加入PM /DNA復(fù)合物12~24小時(shí)后進(jìn)行,。
附表:不同培養(yǎng)體系推薦初始轉(zhuǎn)染條件
培養(yǎng)皿 | 96 孔板 | 48 孔板 | 24 孔板 | 12 孔板 | 6 孔板 | 10cm 皿 | |
表面積cm2 | 0.35 | 1.0 | 1.9 | 3.8 | 9.6 | 59 | |
Trans buffer,、試劑、DNA 量 | Trans buffer(μl) | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 | 2000 |
PM(μl) | 0.5 | 1.3 | 2.5 | 5 | 10 | 50 | |
1μg/μl plasmid (μl) | 0.16 | 0.4 | 0.8 | 1.6 | 3.2 | 16 | |
培養(yǎng)基(ml) | 0.1 | 0.25 | 0.5 | 1.0 | 2.0 | 10 |
儲(chǔ)存/保存方法:
-20℃避光保存,Trans buffer 可保存于2-8°C,,有效期1年,,使用前輕輕混勻。
試劑盒包裝:
貨 號(hào) | PM試劑 | Trans buffer |
abs60256-0.1ml | 0.1ml | 4ml |
abs60256-0.5ml | 0.5ml | 20ml |
abs60256-1.0ml | 1.0ml | 40ml |
abs60256-1.5ml | 1.5ml | 60ml |
產(chǎn)品用途:
大鼠肝細(xì)胞,、血管平滑肌細(xì)胞,、血管內(nèi)皮細(xì)胞,、肺泡上皮細(xì)胞,、乳腺癌細(xì)胞,、肺癌細(xì)胞、大腸癌細(xì)胞,、肝癌細(xì)胞等,。
* 注意: 本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)