分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

產(chǎn)品品牌:

分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

測序?qū)嶒?yàn)流程:

分子克隆的相關(guān)載體: DNA的片段的克隆需要合適的載體，載體或是質(zhì)粒,，或是噬菌體,，或是病毒，通常大多經(jīng)過人工改造,。作為載體必須具備兩條件:-是該載體在細(xì)胞內(nèi)必須能自主復(fù)制,， 即必須具備復(fù)制原點(diǎn);二是該載體必須具備適合的酶切位點(diǎn)，且這些酶切位點(diǎn)不在復(fù)制原點(diǎn)區(qū)域內(nèi),。以上兩條,，保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽隆克隆,，載體上常有篩選標(biāo)記,，如對抗菌素的抗性，某些基因產(chǎn)物的顯色反應(yīng)等,。

服務(wù)要求:

1,、請以郵件、文字等形式告知我們服務(wù)的主要目的及具體要求,。

2,、提供外源DNA的來源及背景資料。DNA來源包括: PCR擴(kuò)增產(chǎn)物; RT - PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;從其它質(zhì)粒上酶切得到的DNA的片段等,。

3,、提供DNA的片段的電泳照片,并請標(biāo)明Marker有濃度。

4,、提供載體來源與背景資料,。

5、注明克隆使用的酶切位點(diǎn)以及是否需要平端連接等,。

相關(guān)材料說明:

1,、對于實(shí)驗(yàn)材料中涉及病原體等危險(xiǎn)材料不接受。

2,、實(shí)驗(yàn)中涉及的堿基序列請以郵件的形式發(fā)到我中心,。

3、實(shí)驗(yàn)中的使用載體要盡量提供背景資料: (質(zhì)粒大小,， 抗性,，拷貝數(shù),，多克隆位點(diǎn)等)如果是商品化載體，請您提供生產(chǎn)廠家及標(biāo)準(zhǔn)名稱;如果所提供載體是您自己構(gòu)建的請注明大體結(jié)構(gòu)情況,。

4,、我中心可以提供常用的如(氨芐青霉素，氯霉素,，卡那霉素)以外的抗生素需您提供,。

5、您自己提供的引物如果為干品,，請您標(biāo)注具體的OD數(shù),，如果是液體態(tài)，請您標(biāo)明濃度,。

6,、可以用甘油菌和穿刺菌形式郵寄菌體。

(建議同時(shí)提供相應(yīng)的質(zhì)粒) ;如果提供質(zhì)粒,，則質(zhì)粒的量建議在4ug以上;如果提供的是PCR產(chǎn)物,，則PCR產(chǎn)物量建議在5u以上(附上電泳圖)

1. 用于提取RNA/DNA的材料要新鮮。采樣時(shí)應(yīng)首先在液氮中速凍,，保存在- 80度的冰箱中,，使用干冰運(yùn)輸。

結(jié)果提供:

1,、相關(guān)的實(shí)驗(yàn)說明和相關(guān)的酶切圖片,。

2、測序的結(jié)果,。

3,、構(gòu)建好的載體和菌液各-份。

4,、如有鑒定的客戶提供PCR鑒定圖片,。

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：