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上海研謹生物科技有限公司

堿性磷酸酶染色操作流程

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更新時間:2025-02-05 17:50:07瀏覽次數(shù):3319次

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應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
提供商: 上海研謹生物
服務(wù)名稱: 堿性磷酸酶染色操作流程
規(guī)格: 樣本
實驗周期: 3周
說明: 含包埋切片,、拍照
價格: 60元
收費標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
歡迎咨詢詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務(wù)協(xié)議,。
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堿性磷酸酶染色實驗服務(wù)

 

 

堿性磷酸酶染色實驗技術(shù)簡介:

堿性磷酸酶(AKP) 的顯示方法由Gomeri (1939) 提出,,現(xiàn)在這種方法稱為Gomeri法,。堿性磷酸酶是指磷酸單酯酶I,它能在pH8. 6~10.0的條件下分解磷酸單酯,,對于與磷酸相接的醇基沒有特異性,,Gomeri法是讓該酶在堿性條件下,分解甘油磷酸鈉,,產(chǎn)生磷酸根。

堿性磷酸酶染色實驗技術(shù)原理:

在一定條件下,,使細胞中的酶作用于酶的底物,,使其產(chǎn)物在原地進行捕捉,、沉淀轉(zhuǎn)化為有色產(chǎn)物。細胞組織中的堿性磷酸酶在堿性(PH9.0- 9.6)環(huán)境下使作用液中的底物(a- 磷酸萘酚鈉)水解,,產(chǎn)生出a蔡酚,,然后再與偶氮鹽偶聯(lián),生成不溶性的耐曬染料(終產(chǎn)物的顏色因所用偶氮鹽的品種不同而有所不同),。

實驗操作流程:

1,、取材、固定,、包埋,、切片;

2.取已粘好烘干的切片兩塊,放入二甲苯(一)→二甲苯(二) (各3-4分鐘) 的染缸中進行脫蠟,,再經(jīng)100%乙醇(一)- +100%乙醇(二) - -95%乙醇- -90%乙醇- -70%乙醇- -30%乙醇- +z水,。 每級各一分鐘,在移切片時,,用鑷子夾住切片震蕩并提起,,放下反復(fù)幾次,在移入下-染缸邊緣前稍停留,。讓溶液滴凈后,再入下一染缸,,以免把上一染缸溶液過多帶入下-染缸,而影響切片質(zhì)量;

3.將其中一塊切片以蠟筆作-標(biāo)記(用作對照組切片),,放入沸水中煮沸5分鐘;

4.將兩塊切片均放入AKP作用液中孵育30-60分鐘,,作用液要事先預(yù)熱到37"C,水浴中進行:

5、取出切片在蒸餾水中洗滌;

6,、放入硝酸鈷溶液2-3分鐘;

7.蒸餾水沖洗干凈,,否則切片易被污染,影響定位;

8,、切片浸入硫化銨中2-3分鐘;

9.蒸餾水沖洗干凈;

10.經(jīng)各級酒精脫水,。即30%乙醇- -70%乙醇- -90%乙醇- -950%乙醇- -100%乙醇 (二)- -100%乙醇 (一),各級一分鐘在顯微鏡下觀察,,細胞中有黑色沉淀存在的地方,,就表明有酶的存在。煮沸的對照切片無黑色沉淀,。

 

 

實驗代做服務(wù):

 

免疫組化IHC染色實驗服務(wù)

細胞,、組織TUNEL凋亡染色實驗服務(wù)

試劑盒免費代檢測

實驗室代做實驗項目

 

透射電鏡服務(wù)實驗服務(wù)

石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡

核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色實驗服務(wù)

免疫共沉淀(CHIRP)實驗

RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP)實驗代做

酶聯(lián)免疫(ELISA)技術(shù)服務(wù)

雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒

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組織芯片/微陣列定制技術(shù)服務(wù)

 

染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實驗服務(wù)

 

多因子液相芯片技術(shù)(Luminex)實驗

免疫細胞化學(xué)ICC實驗服務(wù)

ATP/ADP檢測實驗服務(wù)

蛋白雙向(2-D)電泳實驗服務(wù)

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堿性磷酸酶染色實驗服務(wù)

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(Label-free)

 

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掃描電鏡服務(wù)

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慢病毒包裝實驗服務(wù)

實驗室代做實驗項目

主營:實驗室代做實驗項目$r$n1.實驗代做$r$n2.生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)

免疫組化技術(shù)服務(wù)

公司主營:免疫組化技術(shù)服務(wù)$r$n1實驗代做$r$n2生化試劑,、標(biāo)準(zhǔn)品

實時熒光定量PCR(RealTime PCR)技術(shù)服務(wù)

主營:實時熒光定量PCR(RealTime PCR)技術(shù)服務(wù)$r$n1

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