組織芯片微陣列定制技術服務

實驗技術簡介:

  組織芯片(issue chip),也稱組織微陣列(tissue microarrays),生物芯片技術的一個重要

分支，組織芯片技術是將幾十至.上千個小組織切片集中于-張載片 上形成的縮微組織陣列,，具有體積小,、信息含量高,、高效低耗和可比性強的優(yōu)點。該技術問世十年以來以其大規(guī)模,、高通量,、 標準化等優(yōu)點得到大范圍的推廣應用。組織芯片與基因芯片和蛋白質(zhì)芯片一起構成了生物芯片系列,，使人類第--次能夠有效利用成百上千份組織標本,在基因組,、轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組三個水平上進行研究，被譽為醫(yī)學,、生物學領域的--次革命,。組織芯片技術可以與其他很多常規(guī)技術如免疫組織化學(HC)、核酸原位雜交(ISH),、光原位雜交(FISH)等方法結合應用,，它的應用領域正在不斷地拓展。

實驗操作流程:

制作組織芯片空心蠟模

利用組織芯片空心蠟模成型模具,，--次成型制作組織芯片空心蠟模,，具體操作如下:

1,、將石蠟放入組織芯片制備系統(tǒng)熔蠟盤內(nèi)加熱熔化,，熔蠟盤內(nèi)放入一片適當大小的硬質(zhì)光面塑料薄板。將空心蠟模成型框大口朝下平放于熔蠟盤中的塑料薄板上,調(diào)整熔蠟盤內(nèi)石蠟的量,，使熔化石蠟平面高出空心蠟模成型框約2 mm,。

2、將無刃陣列管針管口朝下放置于組織芯片制備系統(tǒng)加熱板上預熱(70 °C)約10 min,平穩(wěn)垂直插入上述空心蠟模成型框,。

3,、平穩(wěn)移開熔蠟盤，室溫冷卻石蠟數(shù)分鐘,，熔蠟盤中石蠟呈半凝狀態(tài)時,，下壓空心蠟模 成型框活動頂板，使其貼近蠟模成型框,。

4,、用小刀將空心蠟模成型框四周石蠟劃離，繼續(xù)室溫冷卻石蠟數(shù)分鐘,，熔蠟盤中不再有任何能流動的液體狀石蠟,。

5、將熔蠟盤放回組織芯片制備儀上加溫數(shù)秒鐘,，熔蠟盤底部石蠟開始熔化時迅速整體移除陣列管針、蠟模成型框,、蠟模成型框內(nèi)的蠟模,。

6,、插入陣列管針針芯，推出并去除進入陣列管針內(nèi)的石蠟,，拔除陣列管針針芯,，去除蠟模成型框外部殘留的石蠟。

7,、使用組織芯片空心蠟模拔模裝置,，均勻拔除陣列管針， 去除蠟模成型框活動頂板以及蠟模成型框周邊殘留的石蠟,。組織芯片空心蠟模制備完畢,。組織芯片空心蠟模無需從蠟模成型框中取出。

制作組織芯片石蠟塊

1,、目標組織定位:組織芯片供體蠟塊常規(guī)病理切片1張,，厚4μm,常規(guī)HE染色后進行組織病理診斷閱片，在組織切片的指引下,，對相應供體蠟塊進行目標組織定位標記。

2,、組織芯片蠟芯取材與點樣: 將蠟塊放入適當溫度的熱水中預熱軟化片刻,，應用組織芯片制備系統(tǒng)的芯月石蠟組織芯取樣器鉆取目標組織柱,。目標組織柱逐-點樣于組織芯片空心蠟模中指din的位置。用實心單針逐-將目標組織柱輕輕壓平,， 使其處于同-切片平面。將裝滿組織芯的蠟模平行移至一塊薄銅板上,加熱銅板數(shù)秒至貼近銅板的蠟模稍加熔化,，迅速移除銅板,，室溫冷卻數(shù)秒后去除銅板。

3,、二次包埋組織芯片石蠟塊:芯片組織面朝下,將點好樣的組織芯片蠟塊連同蠟模成型框放入盛有少量熔化石蠟的熔蠟盤中(熔化石蠟的深度約4 mm),，數(shù)秒種后即可肉眼觀察到熔化的石蠟浸入到石蠟組織芯與蠟模孔的間隙,。移除熔蠟盤,將塑料石蠟包埋盒放于蠟模成型框上,用勺舀取熔化的石蠟倒入包埋中，室溫冷卻數(shù)分鐘,，石蠟半凝狀態(tài)時用小刀劃離蠟模成型框周圍的石蠟,。石蠟*凝固后,，復加熱熔蠟盤移除二次包埋好的組織芯片石蠟塊,。

4,、去除蠟模成型框以及塑料石蠟包埋盒周邊殘留石蠟，輪流加熱蠟模成型框四周邊框,，使緊貼其邊框內(nèi)側的石蠟熔化,，取出成型的組織芯片石蠟塊。根據(jù)不同的研究目的,，將組織芯片石蠟切片鋪于凈潔的或經(jīng)過其他特殊處理的載玻片上,繼續(xù)應用于常規(guī)HE染色,、免疫組織化學染色以及原位雜交等細胞學或分子生物學檢測。

實驗注意事項:

客戶提供:

1,、實驗對象為組織樣品,，取適量(250~500mg) 新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品，加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑,，勻漿后抽提總蛋白,。

2、實驗對象為細胞樣品,，每份樣品取1x106 ~ 1x107細胞，PBS清洗細胞,，去PBS加0. 1ml~1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑抽提總蛋白,。

3、實驗對象為血清,，則直接進入步驟3,。

交付標準:

1、芯片檢測數(shù)據(jù)

2,、完整的實驗操作規(guī)程、實驗報告(含軟件分析結果)以及實驗材料

服務優(yōu)勢

1,、擁有專業(yè)病理診斷醫(yī)師進行閱片,，對原有診斷進行確認，并統(tǒng)--診斷標準,。

2,、做到切片及供體蠟塊雙標記,確保組織采樣的準確性。

3,、采用高品質(zhì)進口預制備受體蠟塊,，點陣排列整齊美觀，并有多種規(guī)格可以選擇;進口石蠟熱穩(wěn)定性佳,，能確保組織芯與受體蠟塊結合緊密,。

4、擁有專業(yè)的病理技術員進行切片,，每張切片不漏點跳點,，終提供組織陣列完整的切片15套,。

服務內(nèi)容(價格咨詢)

1、閱片服務:專業(yè)病理診斷醫(yī)師進行閱片,并同步完成取樣點標記,，30元/例,。

2、組織芯片蠟塊制作

3,、芯片蠟塊切片

4,、兔疫組化染色

5、兔疫組化染色結果判讀

收費標準/服務周期/提供結果:

歡迎咨詢詳談,，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務協(xié)議,。

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