蛋白雙向(2-D)電泳實驗服務

實驗技術簡介:

雙向電泳(two-dimensional electrophoresis)是等電聚焦電泳和SDS -PAGE的組合,，即先進行等電聚焦電泳(按照pI分離)，然后再進行SDS-PAGE (按照分子大小),， 經(jīng)染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖,。

實驗原理:

雙向電泳是目前為止you效、使用多的蛋白分離方法,。差異蛋白質組學是在雙向電泳后用考麻斯亮藍,、銀離子或熒光染料等將蛋白斑點染色,然后比較差異。本公司在各類微生物,、培養(yǎng)細胞,、動植物組織(如動物軟硬組織、體液,、植物種子,、葉子等)、亞細胞組分的雙向電泳分離及后續(xù)質譜鑒定中均有豐富的經(jīng)驗,。

蛋白質組學雙向電泳技術服務項目:

1.根據(jù)客戶需求定制蛋白質組學實驗方案

2.各種規(guī)格膠條長度的雙向電泳

3.考麻斯亮藍染色,、銀離子染色; .

4.DIGE系統(tǒng)雙向電泳。

5.圖像分析

6.切膠質譜分析

服務說明:

1.我們的實驗只對我們制作的樣本負責,如您提供的是直接做等點聚焦的樣本,，我們不敢保證蛋白的有效分離,。

2.蛋白質組學實驗的總體實驗流程;

實驗流程:

1,、樣本制備

2,、固相預制膠條水化

3、第--向等電聚焦(IEF)

4,、膠條平衡→第二向SDS-PAGE電泳

5,、凝膠染色檢測

6、圖片掃描

雙向電泳服務結果提交:

1,、實驗的試劑耗材,、儀器設備,、操作過程--份;

2、實驗結果凝膠掃描圖片;

3,、電泳凝膠(可收費干膠) ;

4,、剩余樣本。

說明:

1.樣品制備指可用通常程序處理的原樣,，如樣品較特殊(需要去除核酸,、鹽等雜質或需要濃縮)，價格將視進一步處理的難度和耗材用量另行商定;

2.建議客戶提供的原樣(組織,、細胞,、菌體等)濕重不少于100mg如直接提供蛋白提取物，則濃度不少于4ug/ul,總量不少于5mg;

3.樣品的還原和烷基化過程一般在制備時進行;

4.圖象處理與切膠主要是手I操作成本,。

客戶方需提供:

細胞,，組織或蛋白。

實驗周期:

5-10天

可提供技術支持: .

1,、從現(xiàn)有的生物有機體基因組中,經(jīng)過酶切消化或PCR擴增等方法,，獲得帶有目的基因的DNA  的片段。

2,、在體外,，將帶有目的基因的外源DNA  的片段連接到具有選擇標記的載體分子上,形成能夠自主復制的重組DNA分子。

3,、將重組DNA分子轉移到適宜的受體細胞,，并使其一起增殖。

4,、從大量的細胞繁殖群體中,，篩選出獲得了重組DNA分子的受體細胞克隆。

5,、由篩選出來的受體細胞克隆,，提取出已經(jīng)得到擴增的目的基因，供進一步分析研究使用,。

6,、將分離到的目的基因克隆到表達載體上，導入受體細胞,，使之在新的遺傳背景下實現(xiàn)功能表達,，產(chǎn)生出人類所需要的物質。

從2011年開始我們致力于在生命科學領域,、生物醫(yī)學實驗外包及論文潤色服務,，協(xié)助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年，是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間,、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,，歡迎您與我們聯(lián)系,。

實驗代做服務：