六胺銀法染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)
實(shí)驗(yàn)原理:
利用氧化劑氧化細(xì)菌和真菌內(nèi)的細(xì)胞壁內(nèi)的粘多糖等成分而暴露出醛基酸基還原六胺銀內(nèi)的銀離子為黑色的金屬銀而顯色,。同理,腎小球基膜內(nèi)含有一些多糖成分,, 易于被氧化露出醃基而被染色,。
六胺銀法實(shí)驗(yàn)步驟:
1、切片經(jīng)二 甲苯5min*2,,無水乙醇5min*2,、 95%乙醇6min*2,、 85%乙醇5min,、 70%乙醇5min完成脫蠟。脫蠟后自來水洗5min,。
2,、加入1%過碘酸水溶液中作用10min>自來水洗,然后蒸憶水洗二次,每次3min,。
3,、六氣銀液預(yù)熱至65t,切片放入其中浸染75min蒸餡水洗二次,每次3min,。
4,、用0.1%氯化金調(diào)色處理5min蒸憶水洗二次,每次3min。
5,、用5%硫代酸鈉處理5min蒸惘水洗二次,每次3min,。
6、用0.5%亮綠復(fù) 染細(xì)胞質(zhì),。
7,、切片再經(jīng)70%乙醇、80%乙醇,、90%乙醇各Imin:經(jīng)95%Z醇imin.換液重復(fù)-次;無水乙醇2min,,換液重復(fù)一次快速脫水,后用二甲苯透明5min,換液重復(fù)一次,。
8,、根據(jù)蓋玻片規(guī)格和載玻片上組織多少,滴加適量中性樹膠,,封片,。
操作要求:
1、氧化切片很重要,。氧化液種類和濃度,、作用時(shí)間影響陽性結(jié)果的數(shù)量。
2,、使用的容器應(yīng)保持清潔,,才能保證結(jié)果的穩(wěn)定性。
結(jié)果判定:
細(xì)菌,、真菌的粘多糖成分被染成深黑色,,腎小球基膜也被染成深黑色,背景為淡綠色或無色,。
[項(xiàng)目開展范圍]慢病毒,腺病毒,,RNAI類, 分子生物實(shí)驗(yàn),,病理實(shí)驗(yàn),,免疫學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞實(shí)驗(yàn),,動(dòng)物實(shí)驗(yàn),,蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn),,芯片類實(shí)驗(yàn),并為廣大客戶朋友們提供課題設(shè)計(jì)指導(dǎo),、基金申請指導(dǎo),、SCI. 核心期刊等服務(wù)。
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實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):
實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
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細(xì)胞熒光染料標(biāo)記檢測實(shí)驗(yàn)
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染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
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