DIGE技術實驗服務
實驗技術簡介:
DIGE一雙向熒光差異凝膠電泳(Two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis ,2D-DIGE),，是在傳統(tǒng)雙向電泳的基礎上發(fā)展而來的新型蛋白質組學定量技術,，其分離蛋白質混合的原理與雙向電泳是一致的,， 主要利用蛋白質的等電點和分子量的差異來分離蛋白質混合物，同時應用熒光染料的靈敏度及內標的使用等技術,，使其在定量蛋白質組學的研究中效果明顯優(yōu)于傳統(tǒng)雙向電泳,。DIGE使用的熒光染料有Cy2, Cy3和Cy5,它們能與蛋白質的賴氨酸側鏈氨基反應而使蛋白質被標記，被標記蛋白質的等電點和分子量幾乎不受影響,，等量混合標記好的蛋白質后進行雙向電泳,，不同凝膠之間可以通過cy2內標匹配，消除凝膠之間的差異,，蛋白質表達量的變化則通過cy3和cy5不同熒光的強度來體現(xiàn),。
與常規(guī)雙向電泳后，銀染或考染膠相比,，DIGE具有以下優(yōu)勢:
1,、靈敏度高，di可檢測到125pg的蛋白質;
2,、高效性,，同一塊凝膠上可以電泳兩個樣品，減輕了工作量;
3,、線性范圍更廣,，動態(tài)范圍高達10-5;
4、定量精que,采用內標消除了凝膠與凝膠之間的實驗誤差,，顯著提高了實驗的精que度和可重復性;
5,、統(tǒng)計學分析，ImageMaster7.0 (DIGE) 軟件可以得到統(tǒng)計學可信的結果,，降低了操作者之間的偏差,。
DIGE技術服務流程
DIGE技術服務內容
1、樣本制備與定量; .
2,、熒光標記;
3,、雙向電泳和圖片分析;
4、DIGE實驗報告提交,。
送樣須知:
1、技術咨詢:在您開展實驗之前,，本公司將為您竭誠提供有效的DIGE實驗設計方案,。
2、為了保證DIGE實驗能順利進行,，樣品須液氮或干冰保存寄送,，
注:樣本應避免各類污染和反復凍融。
實驗報告內:
1,、DIGE熒光電子圖片;
2,、蛋白質點定量分析結果,，包括差異點號碼、差異倍數(shù),、pI和MW等;
3,、完整實驗報告，包括實驗步驟,、使用儀器,、軟件檢索參數(shù)等。
實驗代做服務：
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