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腎上腺素（EPI）ELISA 試劑盒

ELISA的試劑

在臨床檢驗中一般采用商品試劑盒進行測定,。ELISA中有三個必要的試劑：免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等,。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：

⑴已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）,；

⑵酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；

⑶酶的底物,；

⑷陰性對照品和陽性對照品（定性測定中）,，參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測定中）；

⑸酶聯(lián)物（結(jié)合物）及標(biāo)本的稀釋液,；

⑹洗滌液,；

⑺酶反應(yīng)終止液。

腎上腺素（EPI）ELISA 試劑盒

定量測定

ELISA操作步驟復(fù)雜,，影響反應(yīng)因素較多,，特別是固相載體的包被難達到各個體之間的*，因此在定量測定中,，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬,，曲線高點的吸光度可接近2.0,，繪制時常用半對數(shù)值，以檢測物的濃度為橫坐標(biāo),，以吸光度為縱坐標(biāo),，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形,，其頭,、尾部曲線趨于平坦，中央較呈直線的部分是理想的檢測區(qū)域,。

測定小分子量物質(zhì)常用競爭法,，其標(biāo)準(zhǔn)曲線中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負(fù)相關(guān)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同,。ELISA測定的標(biāo)準(zhǔn)曲線注意圖中橫坐標(biāo)為對數(shù)關(guān)系,，這更有利于測定系統(tǒng)的表達。

操作程序

1.   分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）,、標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μl,；在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）,。每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外,。輕輕晃動混勻，37℃溫育60分鐘,。

2.   棄去液體,，甩干，每孔加滿稀釋后洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。如此重復(fù)5次,，拍干。