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神經(jīng)肽Y（NPY）ELISA 試劑盒

捕獲法

血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在,，后者會干擾IgM抗體的測定。因此測定IgM抗體多用捕獲法,，先將所有血清IgM（包括異性IgM和非特異性IgM）固定在固相上,，在去除IgG后再測定特異性IgM,。操作步驟如下：

⑴將抗人IgM抗體連接在固相載體上，形成固相抗人IgM,。洗滌,。

⑵加入稀釋的血清標本：保溫反應后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質成分,。

⑶加入特異性抗原試劑：它只與固相上的特異性IgM結合,。洗滌。

⑷加入針對特異性的酶標抗體：使之與結合在固相上的抗原反應結合,。洗滌,。

⑸加底物顯色：如有顏色顯示，則表示血清標本中的特異性IgM抗體存在,，是為陽性反應,。

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親和素是一種糖蛋白，一分子親和素可以與四個生物素小分子發(fā)生專一親和作用,，類似抗原與抗體親和,。它們之間的作用力是目前已知強的非共價作用。80年代后,，隨著生物素-親合素系統(tǒng)（BAS）作用被發(fā)現(xiàn),，這一親和作用被結合應用到ELISA技術上，大大提高了后者反應的靈敏性與專一性,。生物素很易與蛋白質（如抗體等）以共價鍵結合,。這樣，結合了酶的親和素分子與結合有特異性抗體的生物素分子產(chǎn)生反應,，既起到了多級放大作用,，又由于酶在遇到相應底物時的催化作用而呈色，達到檢測未知抗原（或抗體）分子的目的,。