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實驗原理ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原,、牽9體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術,。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,，每加入一種試劑孵育后,，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性,。在實際應用中,，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種,。即:用于檢測抗體的間接法(圖a),、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接
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實驗原理DNA是一切生物細胞的重要組成成分,，主要存在于細胞核中,。通過研磨和SDS作用破碎細胞；苯酚和氯仿可使蛋白質變性,，用其混合液（酚：氯仿：異戊醇）重復抽提,，使蛋白質變性，然后離心除去變性蛋白質,；RNase降解RNA,，從而得到純凈的DNA分子。實驗試劑1．生理鹽水2．十二烷基硫酸鈉（SDS）3．三羥甲基氨基甲烷（Tris）4．乙二胺四乙酸（EDTA）5．飽和酚6．氯仿7．異戊醇8．無水乙醇9．75%乙醇10．蛋白酶K11．RNase酶（試劑配制1．Tris–HCL1mol/LPH8.050ml
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實驗試劑1.5x樣品緩沖液（10ml）:0.6ml1mol/L的Tris-HCl(pH6.8),5ml50％甘油,，2ml10％的SDS,，0.5ml巰基乙醇，1ml1％溴酚藍,，0.9ml蒸餾水,。可在4℃保存數(shù)周,，或在－20℃保存數(shù)月,。2.凝膠貯液：在通風櫥中，稱取丙烯酰胺30g,，甲叉雙丙烯酰胺0.8g,，加重蒸水溶解后，定容到100ml,。過濾后置棕色瓶中,，4℃保存,，一般可放置1個月。3.pH8.9分離膠緩沖液：Tris36.3g,，加1mol/LHCl48ml,，加重蒸水80ml使其溶解，調(diào)pH8.9,，
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實驗原理瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產(chǎn)物,。（原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗）本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒（AgaroseGelDNAPurificationKit），該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒,。試劑盒采用了*的凝膠融解系統(tǒng),，結合DNA制備膜技術，具有,、快速,、方便的特點，全套操作只需30min便可完成,。使用該試劑盒每次可純化得到多至10μg的DNA片段（100bp～30kb）,，回收率高達50～80%。本試劑盒回收純化的DNA片段純度高,，完整性好,，可直接
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實驗原理若將可溶性的鼻疽抗原吸附在比其體積大千萬倍的紅細胞表面上，使紅細胞產(chǎn)生一種新的血清學性質,，制成所謂的致敏紅細胞,，即可用以診斷鼻疽。只要與少量相應抗體相遇,，紅細胞通過抗原抗體反應,，即可被動地結合在一起,，呈現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象,，陰性者紅細胞由于自然沉積于孔底，則呈圓點狀,。這樣可以明顯地提高反應的敏感性,。間接血凝試驗即間接紅細胞凝集試驗，它也存在一些缺點,，例如不同批次制備的抗原或紅細胞,，在敏感性和穩(wěn)定性方面，可能不一致,，它很容易受外界因素的影響,，發(fā)生非特異性凝集，所以應用的器皿等就應當清潔,，不
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實驗試劑三氯,、石蠟,。實驗設備剪刀，分析天平,，稱量皿（或鋁盒）,，烘箱，刀片,，金屬（有機玻璃也可）模板（或打孔器）,，紗布，夾子,，有蓋搪瓷盤,，錫紙等。實驗材料生長于田間的植株,。實驗步驟1．選擇測定樣品：實驗可在晴天上午8~9點鐘開始,，預先在田間選定有代表性的葉片（如葉片在植株上的部位、年齡,、受光條件等）10張,，掛牌編號。2．葉子基部處理,，目的是將葉子輸導系統(tǒng)的韌皮部破壞：1)棉花等雙子葉植物,，可用刀片將葉柄的外皮環(huán)割約0.5cm寬，切斷韌皮部運輸,。2)小麥,、水稻等單子葉植物，由于韌皮部和木質部難以分開
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一,、芯片制備基因芯片的制備主要有兩種基本方法,，一是在片合成法，另一種方法是點樣法,。在片合成法是基于組合化學的合成原理,它通過一組定位模板來決定基片表面上不同化學單體的偶聯(lián)位點和次序,。在片合成法制備DNA芯片的關鍵是高空間分辨率的模板定位技術和固相合成化學技術的精巧結合。目前,，已有多種模板技術用于基因芯片的在片合成,如光去保護并行合成法,、光刻膠保護合成法、微流體模板固相合成技術,、分子印章多次壓印原位合成的方法,、噴印合成法。在片合成法可以發(fā)揮微細加工技術的優(yōu)勢,，很適合制作大規(guī)模DNA探針陣列芯片,，實
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實驗試劑1.PBS（Dulbecco）：0.10g/L無水CaCl20.20g/LKCl0.20g/LKHPO40.10g/LMgCl2.6H2O8.00g/LNaCl2.16g/LNaH2PO4.7H2O調(diào)pH至7.42.生長培養(yǎng)基：不含谷氨酰胺的RPMI1640培養(yǎng)基10%FBS慶大霉素（可不用）（10μg/ml）2mmol/LL-谷氨酰胺1mmol/L丙酮酸鈉3.促細胞分裂劑（終濃度）5μg/mlPHA：1mg/ml母液-20℃分裝凍存25μg/ml刀豆凝集素A（conA）：0.4mg/m
