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關(guān)鍵詞:Sunset Laboratory

上海乾思生物Sunset Laboratory品牌代理經(jīng)營進(jìn)口胎牛血清,、細(xì)胞因子、ELISA試劑盒,、細(xì)胞,、抗體,、生物試劑、耗材,、培養(yǎng)基,、一抗、二抗,、其產(chǎn)品吸附均勻,，吸附性好，空白值低,，孔底透明度高,，代做ELISA實驗等。完善的庫存及供應(yīng)體系以及高效穩(wěn)定的純化技術(shù),，保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性,。

怎樣查到一個特定細(xì)胞株的相關(guān)知識和培養(yǎng)條件？
ATCC（American Type Culture Collection）收集了絕大多數(shù)細(xì)胞的詳細(xì)資料,。打開ATCC網(wǎng)頁的Cells and hybridomas鏈接,，輸入細(xì)胞名稱就可以搜索ATCC的細(xì)胞數(shù)據(jù)庫。數(shù)據(jù)庫中有每一種細(xì)胞的詳細(xì)描述,，包括細(xì)胞的來源,，培養(yǎng)和凍存條件，以及相關(guān)文獻(xiàn)等資料,。
如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基,？
培養(yǎng)某類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,，很可能在DMEM或M199中同樣容易生長,。總之,，*MEM,、DMEM做貼壁細(xì)胞培養(yǎng)；RPMI1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng),；各種目的無血清培養(yǎng)*AIMV培養(yǎng)基（SFM）,。

測序?qū)嶒灹鞒蹋?br style="box-sizing: border-box; margin: 0px;"/>1 收集樣品
2 相關(guān)試劑 總RNA提取試劑TREzol Reagent (RNA提取試劑), M-MLV(cDNA逆轉(zhuǎn)錄酶), RNA 純化試劑, RealqPCR MasterMix (熒光定量PCR預(yù)混試劑)。
3 實驗儀器 熒光定量PCR儀; PCR儀;低溫離心機(jī),。
4 總RNA提取
5 cDNA合成 在0.5ml的離心管中加入1µl模板總RNA(1µg/µl); 2µl隨機(jī)引物(T18, 10pmol/ul);2µl 10mM dNTP mix;加水至15µl體系,。混勻后70℃變性RNA 5分鐘,，冰上速冷1分鐘,，離心將溶液收集至管底加入6µl 5×PCR buffer;1µl RNaseout;1µl M-MLV RT;加水至30µl體系。PCR儀中反應(yīng)條件設(shè)置 37℃延伸60min,，70℃保溫15min終止反應(yīng),。合成好的cDNA置于 -20 ℃保存?zhèn)溆谩?br style="box-sizing: border-box; margin: 0px;"/>