真菌基因組DNA提取試劑盒說明書|貨號：D2300

生產(chǎn)廠家：北京索萊寶

貨號：D2300

規(guī)格：50T/ 100T

保存：室溫(15℃-25℃) 干燥保存,，復檢期12個月,，2℃-8℃保存時間更長。

真菌基因組DNA提取試劑盒內(nèi)容：

RNase A,、蛋白酶K,、玻璃珠、溶液A,、溶液B,、漂洗液、洗脫液,、吸附柱,、收集管、說明書

真菌基因組DNA提取試劑盒說明： 真菌是具有真核和細胞壁的異養(yǎng)生物,。種屬很多,，已報道的屬達1萬以上，種超過10萬個,。真菌通常又分為三類,，即酵母菌、霉菌和蕈菌（大型真菌）,。對于酵母菌和霉菌,，可以用玻璃珠處理，而對于大型真菌,，可直接用液氮研磨,。經(jīng)過前期處理的菌液，用硅質(zhì)膜吸附,，即可得到高純度的基因組,。提取純化后的DNA，可以直接用于 PCR/Real time-PCR,，sequencing,，Southern blot,，mutant analysis，SNP 等下游應(yīng)用實驗,。

真菌基因組DNA提取試劑盒操作步驟： 使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,，加入體積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心,。

1,、 樣品的處理： 1）對于酵母菌，取1-2ml培養(yǎng)好的菌液,，離心收集,，棄上清。加入200ul 溶液A,，加入20ul RNase A,，再加入100mg玻璃珠，在高速振蕩器上振蕩,，約5-10min,。 2）霉菌(孢子也可相同處理)：取50-100mg菌絲，加200ul溶液A,，用玻璃研磨器適當研磨分散菌絲,，加入20ul RNase A，再加入100mg玻璃珠,，在高速振蕩器上振蕩,，約30min。 3）大型真菌（如蘑菇等）：稱取50-100mg樣品,，倒入適量的液氮,，立即研磨重復3 次，使樣品研成粉末（如無液氮,，可加200ul溶液A后用玻璃研磨器適當研磨），加200ul溶液A,，加入20ul RNase A,，再加入100mg玻璃珠，在高速振蕩器上振蕩,，約5min,。

2、加入20ul 10mg/ml的蛋白酶K,，充分混勻,，55℃水浴消化，30min,。消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,，12000rpm離心2min,。將上清轉(zhuǎn)移到一個新的離心管中。如有沉淀,，可再次離心,。

3、在上清中加入200ul溶液B,，充分混勻,。如出現(xiàn)白色沉淀，可放55℃水浴5min,，沉淀即會消失,，不影響后續(xù)實驗。如溶液未變清亮,，說明樣品消化不*,，可能導致提取的DNA量少及不純，還有可能導致上柱后堵柱子,，請增加消化時間,。

4、再加入200ul無水乙醇,，充分混勻,，此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀，不影響DNA的提取,，將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中,，放置2分鐘。

5,、12000rpm離心1min,，棄廢液，將吸附柱放入收集管中,。

6,、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1min,，棄廢液,，將吸附柱放入收集管中。

7,、向吸附柱中加入500ul漂洗液,，12000rpm離心1min，棄廢液,，將吸附柱放入收集管中,。 8、12000rpm離心2min,，將吸附柱置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘,，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,，否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實驗如酶切、PCR等,。

9,、將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜*懸空滴加50-200ul經(jīng)65℃水浴預熱的洗脫液,，室溫放置5min,，12000rpm離心1min。

10,、離心所得洗脫液再加入吸附柱中,，室溫放置2min，12000rpm離心2min,，即可得到高質(zhì)量的基因組DNA,。

真菌基因組DNA提取試劑盒注意事項：

1.       由于真菌種類萬千，對于一些特別難處理的真菌,，可用液氮研磨,，再用玻璃珠振蕩，蛋白酶K處理,，一般都可以得到一定量的基因組DNA,，如電泳檢測很弱，一般PCR都會有較好結(jié)果,。

2. 若溶液A或溶液B中有沉淀,，可在55℃水浴中重新溶解。

3. 如果DNA提取量很少,，可加長玻璃珠處理時間,，如果提取DNA成彌散短條帶，可減少玻璃珠處理時間,。

4. 洗脫緩沖液的體積好不少于50ul,，體積過小會影響回收效率；洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,，若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍),，pH值低于7.0會降低洗脫效率；DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,，以防DNA降解,。

5. DNA濃度及純度檢測：得到的基因組DNA的片段的大小與樣品保存時間,、操作過程中的剪切力等因素有關(guān),。回收得到的DNA的片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度,。DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰,，OD260值為1相當于大約50 μg/ml雙鏈DNA,、40 μg/ml單鏈DNA。OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9,，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,，而使用去離子水，比值會偏低,，因為pH值和離子存在會影響光吸收值,，但并不表示純度低。 6. 在確保樣品無誤的情況下,，如經(jīng)過多次試驗,，都無法提出DNA，請將部分樣品寄至我公司,，我們代為摸索優(yōu)化條件,，以使您的實驗能夠正常進行下去。

真菌基因組DNA提取試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：

E1020 EB染色液

D1010 6×DNA Loading Buffer

T1060 50×TAE 緩沖液

T1050 5×TBE 緩沖液

M1060 D2000 DNA Ladder

M1400 1kb DNA Ladder

G8142 GoldView II型核酸染色劑(5000×)

科研領(lǐng)域真菌基因組DNA提取試劑盒

生化試劑庫存現(xiàn)貨,，歡迎訂購,！

生化試劑專業(yè)廠家，涵蓋科研領(lǐng)域的全面試劑：培養(yǎng)基,、抗體,、免疫組化、SABC試劑盒,、基因工程,、氨基酸、堿基與核酸,、多肽及蛋白質(zhì),、酶、維生素,、抗體,、染色劑、糖與碳水化合物,、生物緩沖液,、植物生長激素、鹽和酸,、胺,、層析介質(zhì)、常用的生化試劑,、蛋白質(zhì)提取,、蛋白質(zhì)電泳、蛋白質(zhì)定量、試劑盒,、等,。

備注：我司擁有覆蓋科研領(lǐng)域的其他試劑現(xiàn)貨庫存，,！

elisa試劑盒（免費代測） QIAGEN試劑盒 gibco血清  hyclone血清  Peprotech細胞因子Gibco培養(yǎng)基Corning耗材PCR八連排管(平) 濾器  西班牙瓊脂糖  潮霉素B  蛋白酶k  低熔點瓊脂糖 過硫酸胺 抗壞血酸 溴酚藍 噻孢霉素 羧芐青霉素 維生素 黃嘌呤 臺盼藍TRIS  蔗糖 多粘菌素B  碘化丙啶 辣根過氧化物酶  馬來酸 L-谷氨酰胺 硫酸卡那霉素 咪唑 HEPES 甘氨酸 赤霉素 還原型谷胱甘肽 氧化型谷胱甘肽G-418 福林酚 牛血清白蛋白Ⅴ 人血清白蛋白   大量生化試劑現(xiàn)貨批發(fā)   分裝（原裝）當天發(fā)貨

誠招全國各地經(jīng)銷商,，我司負責售后也！大量現(xiàn)貨庫存,！歡迎您的加盟,！

科研領(lǐng)域EDDS/N,N'-(1,2-乙烷二基)雙天冬氨酸/CAS:20846-91-7

另外新增：

質(zhì)量穩(wěn)定的彩虹marker，可4度保存彩虹marker,，價格實惠彩虹marker,，北京索萊寶可以提供彩虹marker試用裝，歡迎您咨詢訂購