革蘭氏染色液使用說明書
貨號:G1060
規(guī)格:10ml/100ml
保存:陰涼處保存,,保質(zhì)期3-6個月。
產(chǎn)品內(nèi)容:
結(jié)晶紫,;碘液,;95%酒精;蕃紅,。
產(chǎn)品簡介:
革蘭氏染色法是細菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,,通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物,,革蘭氏陽性菌細胞壁較厚,肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,,乙醇脫色時,肽聚糖脫水使孔徑縮小,,故保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細胞膜上,,呈紫色。革蘭氏陰性菌細胞壁薄,、外膜層類脂含量高,、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,脫色后類脂外膜迅速溶解,,縫隙加大,,結(jié)晶紫與碘復(fù)合物溶出,,因此乙醇脫色后再經(jīng)番紅復(fù)染,,呈紅色,。
操作步驟:
1. 涂片固定
菌液涂片時不可過于濃厚,,干燥,、固定,。固定時通過火焰1-2次即可,,不可過熱,,以載玻片不燙手為宜,。
2. 染色
一般包括初染,、媒染,、脫色,、復(fù)染等四個步驟,,具體操作方法是:
(1)加上結(jié)晶紫后,,染色1分鐘,,水洗,。 (2)加上碘液后染色1分鐘,,水洗,。 (3)加上95%酒精,搖動玻片,根據(jù)涂片厚度,脫色約20-60秒,,水洗,,吸去水分,。 (4)加上蕃紅后,,染色1分鐘,,水洗,。 (5)吸干或在空氣中涼干后,,油鏡鏡檢,。 革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴格掌握酒精脫色程度,,如脫色過度,則陽性菌可被誤染為陰性菌,;而脫色不夠時,,陰性菌可被誤染為陽性菌。此外,,菌齡也影響染色結(jié)果,,如陽性菌培養(yǎng)時間過長,或已死亡及部分菌體自行溶解,,都常呈陰性反應(yīng),。
3. 結(jié)果觀察:革蘭氏陰性菌呈紅色,革蘭氏陽性菌呈紫色,。以均勻分散開的細菌的革蘭氏染色反應(yīng)為準,,過于密集的細菌,,常常呈現(xiàn)假陽性,。
注意事項: 1.標本涂片不能太厚,,嚴格按操作要求進行,。若涂片較厚,,應(yīng)延長脫色時間,,直至不再出現(xiàn)紫色為止。 2.玻片通過火焰溫度不能太高,。 3.碘液變透明,則不能使用,。 4.水洗時動作要輕柔,沿載玻片對角線方向用洗瓶
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