革蘭氏染色液使用說(shuō)明書(shū)
貨號(hào):G1060
規(guī)格:10ml/100ml
保存:陰涼處保存,,保質(zhì)期3-6個(gè)月,。
產(chǎn)品內(nèi)容:
結(jié)晶紫,;碘液,;95%酒精;蕃紅,。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,,通過(guò)結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,,在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物,革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁較厚,,肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,,乙醇脫色時(shí),肽聚糖脫水使孔徑縮小,,故保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細(xì)胞膜上,,呈紫色。革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁薄,、外膜層類脂含量高,、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,脫色后類脂外膜迅速溶解,,縫隙加大,,結(jié)晶紫與碘復(fù)合物溶出,因此乙醇脫色后再經(jīng)番紅復(fù)染,,呈紅色,。
操作步驟:
1. 涂片固定
菌液涂片時(shí)不可過(guò)于濃厚,干燥,、固定,。固定時(shí)通過(guò)火焰1-2次即可,不可過(guò)熱,,以載玻片不燙手為宜,。
2. 染色
一般包括初染、媒染,、脫色,、復(fù)染等四個(gè)步驟,具體操作方法是:
(1)加上結(jié)晶紫后,,染色1分鐘,,水洗。 (2)加上碘液后染色1分鐘,,水洗,。 (3)加上95%酒精,搖動(dòng)玻片,根據(jù)涂片厚度,脫色約20-60秒,水洗,,吸去水分,。 (4)加上蕃紅后,染色1分鐘,,水洗,。 (5)吸干或在空氣中涼干后,油鏡鏡檢,。 革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴(yán)格掌握酒精脫色程度,,如脫色過(guò)度,,則陽(yáng)性菌可被誤染為陰性菌;而脫色不夠時(shí),,陰性菌可被誤染為陽(yáng)性菌,。此外,菌齡也影響染色結(jié)果,,如陽(yáng)性菌培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),,或已死亡及部分菌體自行溶解,都常呈陰性反應(yīng),。
3. 結(jié)果觀察:革蘭氏陰性菌呈紅色,,革蘭氏陽(yáng)性菌呈紫色。以均勻分散開(kāi)的細(xì)菌的革蘭氏染色反應(yīng)為準(zhǔn),,過(guò)于密集的細(xì)菌,,常常呈現(xiàn)假陽(yáng)性。
注意事項(xiàng): 1.標(biāo)本涂片不能太厚,,嚴(yán)格按操作要求進(jìn)行,。若涂片較厚,應(yīng)延長(zhǎng)脫色時(shí)間,,直至不再出現(xiàn)紫色為止,。 2.玻片通過(guò)火焰溫度不能太高。 3.碘液變透明,,則不能使用,。 4.水洗時(shí)動(dòng)作要輕柔,沿載玻片對(duì)角線方向用洗瓶
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