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北京索萊寶臺盼藍染色液使用說明書

來源:北京索萊寶科技有限公司   2013年04月03日 14:44  

臺盼藍染色液使用說明書
貨號:C0040
規(guī)格:50ml,、100ml
保存:4℃保存,一年有效,。
產品簡介:
臺盼藍(Trypan Blue)或稱臺盼蘭,、錐蟲藍,是細胞活性染料,,常用于檢測細胞膜的完整性與細胞的存活率,,是組織和細胞培養(yǎng)中常用的死細胞鑒定染色方法之一。正常的活細胞細胞膜結構完整,,能夠排斥臺盼藍,,細胞不會被染成藍色;而喪失活性或細胞膜不完整的細胞可被臺盼藍染成藍色,。通常認為細胞膜完整性喪失,,即可認為細胞已經死亡。
臺盼藍可被巨噬細胞吞噬,,故可用于巨噬細胞的活體染色劑,。凋亡小體也有臺盼藍拒染現象。臺盼藍染色后,,通過顯微鏡下直接計數或顯微鏡下拍照后計數,,就可以對細胞存活率進行比較的定量。染色時間只需3-5分鐘,,操作簡單,。
臺盼藍染色液使用說明:
1. 收集細胞:
用胰酶和/或EDTA消化貼壁細胞,懸浮細胞可直接收集,。收集的細胞時用1000-2000 rpm離心1分鐘,,棄上清,制備單細胞懸液,,并做適當稀釋,。
2. 臺盼藍染色:
細胞懸液與0.4%臺盼藍溶液以9:1比例混勻(終濃度0.04%),染色3分鐘 ( 染色3分鐘時間已經足夠,,但染色時間可以更長一些,,但不宜超過10分鐘) 。
3. 細胞計數:
吸取少量經過染色的細胞,,用血細胞計數板計數,。死細胞著藍色并膨大,無光澤,;活細胞不著色并保持正常形態(tài),,有光澤。通常要比較地進行定量,,每個細胞樣品至少數500 個細胞,。
細胞存活率(%)= 活細胞總數/(活細胞總數+死細胞總數)×100%
注意事項:
1. 染色時間不能太長,否則活細胞也會逐漸積累染料而染成顏色,,使檢測結果偏低,;
2. 有潛在致癌危險,為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。
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31800 RPMI Medium 1640
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