Masson 三色染色試劑盒
Masson 三色染色是結(jié)締組織染色知更鳥經(jīng)典的一種方法,,是顯示組織中纖維的主要方法之一,是膠原纖維染色而經(jīng)典的技術(shù)方法,。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān):分子的大小由分子量來體現(xiàn),,小分子量容易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織,;而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)稀松的,、滲透性高的組織。然而,,淡綠或苯胺藍(lán)的分子量很大,,因此Masson染色后肌纖維呈紅色,膠原纖維呈綠色或藍(lán)色,,主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維,。
Masson試劑盒的特點:◆染色穩(wěn)定;◆分化時間短,,1-2分鐘,;◆色彩清楚鮮艷;◆使用范圍廣,,適宜于組織的石蠟切片,、冰凍切片等染色;◆所染切片保存時間長且不易褪色,。
產(chǎn)品組成:
試劑(A-1) 蘇木素染色液 25ml
試劑(A-2) 三氯化鐵水溶液 25ml
試劑(B) 鹽酸乙醇分化液 50ml
試劑(C) 氨水水溶液 50ml
試劑(D) 麗春紅酸性品紅染色液 50ml
試劑(E) 乙酸水溶液 50ml
試劑(F) 磷鉬酸水溶液 50ml
試劑(G) 苯胺藍(lán)染色液 50ml
注:臨用時取A1,、A2等量混合,成為試劑A,,不可預(yù)先配制后放置,,因染色液的色素根與鐵會化合。形成不容性沉淀,,等量混合后,,一般24小時后失去人力,。
主要成分:
試劑(A):主要由蘇木素和三氯化鐵組成。
試劑(B):主要由乙醇和鹽酸水溶液組成,。
試劑(C):主要由稀氨水水溶液組成,。
試劑(D):主要由麗春紅和酸性品紅組成。
試劑(E):主要由乙酸水溶液組成,。
試劑(F):主要由磷鉬酸水溶液組成,。
試劑(G):主要由苯胺藍(lán)和弱酸組成。
操作步驟:
固定液應(yīng)選用甲醛鹽溶液,、中性福爾馬林試劑(10%,NBF)進(jìn)行固定,。
1,、切片脫蠟至水。
2,、試劑(A)染色5min-10min,。
3、試劑(B)分化,、水洗,。
4、試劑(C)返藍(lán),、水洗,。
5、蒸餾水或者去離子水洗1min,。
6,、試劑(D)染色5-10min。
7,、試劑(E)洗1min,。
8、試劑(F)洗1-2min
9,、試劑(E)洗1min,。
10、直接放入試劑(G)中染色1-2min,。
11,、試劑(E)洗1min。
12,、95%乙醇快速脫水,。
13、無水乙醇(1)5-10秒,。
14,、無水乙醇(2)5-10秒,。
15、無水乙醇(3)5-10秒,。
16,、二jia苯(1)1-2分。
17,、二jia苯(2)1-2分,。
18、二jia苯(3)1-2分,。
19,、中性樹膠封固。
染色結(jié)果:細(xì)胞核呈藍(lán)色,、胞漿,、肌肉、紅細(xì)胞呈紅色,,膠原纖維/蛋白呈藍(lán)色,。
注意事項:
1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈,。
2,、組織固定起著非常重要的作用,使用不同的固定液或縮短染色時間
3,、經(jīng)典masson三色染色中,,常要求使用試劑A染核,也可用Harris 蘇木精染核,,但Harris 蘇木精染核后切片顏色不夠鮮艷,,因為色目的主要在于區(qū)分膠原纖維和肌纖維,一般也可以省略該染色步驟,。
4,、試劑B的分化時間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和新舊而定,。
5,、試劑E為0.2%乙酸水溶液,可使色彩更清楚鮮艷,、如果使用量大可自行配制,。
6、用試劑F分化要在鏡下控制,,分化到膠原纖維呈淡紅色,。纖維呈紅色即可。分化時間根據(jù)染色深淺而定,。一般1-2min,。
7,、返藍(lán)液常使用氨水水溶液,亦可自行配制Scoot 促藍(lán)液或0.1-1%*水溶液,。
8,、戴一次性手套操作。
9,、使用場所應(yīng)通風(fēng),,并遠(yuǎn)離火源。
儲存條件:
2-25℃ 避光
科研領(lǐng)域Masson 三色染色試劑盒
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