Masson 三色染色試劑盒
Masson 三色染色是結(jié)締組織染色知更鳥經(jīng)典的一種方法,是顯示組織中纖維的主要方法之一,,是膠原纖維染色而經(jīng)典的技術(shù)方法,。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān):分子的大小由分子量來體現(xiàn),小分子量容易穿透結(jié)構(gòu)致密,、滲透性低的組織,;而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)稀松的、滲透性高的組織,。然而,,淡綠或苯胺藍(lán)的分子量很大,因此Masson染色后肌纖維呈紅色,,膠原纖維呈綠色或藍(lán)色,,主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。
Masson試劑盒的特點(diǎn):◆染色穩(wěn)定,;◆分化時(shí)間短,,1-2分鐘;◆色彩清楚鮮艷,;◆使用范圍廣,,適宜于組織的石蠟切片、冰凍切片等染色,;◆所染切片保存時(shí)間長且不易褪色,。
產(chǎn)品組成:
試劑(A-1) 蘇木素染色液 25ml
試劑(A-2) 三氯化鐵水溶液 25ml
試劑(B) 鹽酸乙醇分化液 50ml
試劑(C) 氨水水溶液 50ml
試劑(D) 麗春紅酸性品紅染色液 50ml
試劑(E) 乙酸水溶液 50ml
試劑(F) 磷鉬酸水溶液 50ml
試劑(G) 苯胺藍(lán)染色液 50ml
注:臨用時(shí)取A1、A2等量混合,成為試劑A,,不可預(yù)先配制后放置,因染色液的色素根與鐵會化合,。形成不容性沉淀,,等量混合后,一般24小時(shí)后失去人力,。
主要成分:
試劑(A):主要由蘇木素和三氯化鐵組成,。
試劑(B):主要由乙醇和鹽酸水溶液組成。
試劑(C):主要由稀氨水水溶液組成,。
試劑(D):主要由麗春紅和酸性品紅組成,。
試劑(E):主要由乙酸水溶液組成。
試劑(F):主要由磷鉬酸水溶液組成,。
試劑(G):主要由苯胺藍(lán)和弱酸組成,。
操作步驟:
固定液應(yīng)選用甲醛鹽溶液、中性福爾馬林試劑(10%,,NBF)進(jìn)行固定,。
1、切片脫蠟至水,。
2,、試劑(A)染色5min-10min。
3,、試劑(B)分化,、水洗。
4,、試劑(C)返藍(lán),、水洗。
5,、蒸餾水或者去離子水洗1min,。
6、試劑(D)染色5-10min,。
7,、試劑(E)洗1min。
8,、試劑(F)洗1-2min
9,、試劑(E)洗1min。
10,、直接放入試劑(G)中染色1-2min,。
11、試劑(E)洗1min。
12,、95%乙醇快速脫水,。
13、無水乙醇(1)5-10秒,。
14,、無水乙醇(2)5-10秒。
15,、無水乙醇(3)5-10秒,。
16、二jia苯(1)1-2分,。
17,、二jia苯(2)1-2分。
18,、二jia苯(3)1-2分,。
19、中性樹膠封固,。
染色結(jié)果:細(xì)胞核呈藍(lán)色,、胞漿、肌肉,、紅細(xì)胞呈紅色,,膠原纖維/蛋白呈藍(lán)色。
注意事項(xiàng):
1,、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈,。
2、組織固定起著非常重要的作用,,使用不同的固定液或縮短染色時(shí)間
3,、經(jīng)典masson三色染色中,常要求使用試劑A染核,,也可用Harris 蘇木精染核,,但Harris 蘇木精染核后切片顏色不夠鮮艷,因?yàn)樯康闹饕谟趨^(qū)分膠原纖維和肌纖維,,一般也可以省略該染色步驟,。
4、試劑B的分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄,、組織的類別和新舊而定,。
5、試劑E為0.2%乙酸水溶液,,可使色彩更清楚鮮艷,、如果使用量大可自行配制。
6、用試劑F分化要在鏡下控制,,分化到膠原纖維呈淡紅色,。纖維呈紅色即可。分化時(shí)間根據(jù)染色深淺而定,。一般1-2min,。
7、返藍(lán)液常使用氨水水溶液,,亦可自行配制Scoot 促藍(lán)液或0.1-1%*水溶液。
8,、戴一次性手套操作,。
9、使用場所應(yīng)通風(fēng),,并遠(yuǎn)離火源,。
儲存條件:
2-25℃ 避光
科研領(lǐng)域Masson 三色染色試劑盒
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