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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：哈維氏弧菌核酸檢測(cè)試劑盒48T 0.1PCR管
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-02R6526
產(chǎn)品規(guī)格：48T 0.1PCR管
產(chǎn)品分類：水產(chǎn)養(yǎng)殖病害檢測(cè)系列）
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一,、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有,，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物,?？梢允荄NA也可以是RNA,，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì),。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二,、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,，不加或添加石蠟油,。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min,。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服,、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作,；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理,。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記,。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None,。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
CYP450 ELISA Kit 大鼠細(xì)胞色P450Multi-class antibodies： 48T
TIMP-2 金屬蛋白組織抑制因子-2抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Glutaredoxin 1 谷氧還蛋白/巰基轉(zhuǎn)移抗體 0.2ml
CCSA-2(Human colon cancer-specific antigen-2) ELISA kit 人大腸癌專一抗原2 96T
NCX1 鈉鈣交換蛋白1抗體 0.1ml
ACA11 擬南芥ACA11抗體 1ml
TIMP-2 金屬蛋白組織抑制因子-2抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Beta2-GP1 IgA/G/M(Human Beta2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M) ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗體IgA/G/MMulti-class antibodies： 48T
rInsulin monoclonal (pig) 抗胰島單克隆抗體(豬)Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh LMO2 T細(xì)胞易位蛋白2抗體 0.2ml
CysLTs(Human cysteinyl leukotrienes) ELISA Kit 人半胱酰白三烯 96T
REA B細(xì)胞受體相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
phospho-CstF64(Ser498) 磷化細(xì)胞分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體 0.1ml
rInsulin monoclonal (pig) 抗胰島單克隆抗體(豬)Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit horse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
Gemin 2 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh AKIP 極光激A相互作用蛋白1抗體 0.2ml
lamin B/FITC 熒光標(biāo)記核纖層蛋白B抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
Somatostatin/GRIH /FITC 熒光標(biāo)記生長(zhǎng)抑抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
哈維氏弧菌核酸檢測(cè)試劑盒48T 0.1PCR管豚鼠蛋白酪磷受體N（PTPRN）elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠胎球蛋白A（FETUA）elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠促腎上腺皮質(zhì)（ACTH） elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠促血管生成2（ANG2）elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠血管內(nèi)皮鈣黏蛋白（VE-Cadherin）elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠甲胎蛋白（αFP）elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠游離甲狀腺（fT4）elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠熱休克蛋白27（HSP-27）elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠蛋白活受體3（PAR3）elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠抗生長(zhǎng)抗體（GHAb）elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠上皮中性粒活化肽78（ENA-78）elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠胰蛋白原II（Try2）elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠乳脫氫B（LDHB）elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠血管緊張?jiān)?/span>AGT）elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介6（IL-6）elisa檢測(cè)試劑盒
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL,；空白孔不加。
4.除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
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