化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
ELISA試劑盒注意事項(xiàng)原理
閱讀：495 發(fā)布時(shí)間：2020-8-12ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：
1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,，誤差不能超過(guò)2%,。可用水和電子天平進(jìn)行確定,。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正,。
2、要配備20ul,、50ul,、100ul、1000ul和排槍各一支,。吸取不同的液體后,，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí),。
3,、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫,，以使結(jié)果更穩(wěn)定,。
4、實(shí)驗(yàn)時(shí),，要使底物避光保存,。
5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確,。
6、吸取液體時(shí),，要用量程和需要量接近的槍去吸,，減少誤差。
7,、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會(huì)自然流下去,。
8,、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,，混勻液體,。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
9,、溫浴時(shí),，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā),。
10、洗板時(shí),，每次洗液加入后,，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加*,。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干,。
11,、洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4,，0.02M的磷酸緩沖液,，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存,。
12,、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配,。
13,、檢測(cè)前，要打開(kāi)酶標(biāo)儀,，使之穩(wěn)定10分鐘以上,。
14、底物有一定的毒性,，終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,，應(yīng)盡量避免接觸。
15,、待檢樣品要澄清,，否則會(huì)影響結(jié)果。
ELISA試劑盒試驗(yàn)原理：
試劑盒是固相ELISA試劑盒免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),。先將生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育,。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP,。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A,、B,，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系,。