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ELISA試劑盒注意事項原理

閱讀:713          發(fā)布時間:2020-8-12

ELISA試劑盒注意事項:

1、要保證移液槍的準確性,,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定,。但有專業(yè)人員進行矯正,。
2、要配備20ul,、50ul、100ul,、1000ul和排槍各一支,。吸取不同的液體后,,要更換槍頭,。即使是吸取標準品時。
3,、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,,使各種試劑都恢復到室溫,,以使結果更穩(wěn)定,。
4,、實驗時,,要使底物避光保存。
5,、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確,。
6,、吸取液體時,,要用量程和需要量接近的槍去吸,,減少誤差,。
7,、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去,。
8、液體全部加完后,,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體,。也可以用酶標儀的晃動功能,。
9、溫浴時,,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,,防止水分的蒸發(fā)。
10,、洗板時,,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,,使清洗更加*,。沒有洗板機時,倒去液體后,,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干,。
11、洗液不夠時,,可用蒸餾水自行配制PH7.4,,0.02M的磷酸緩沖液,,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存,。
12,、底物是光敏感的,要在臨用前現配,。
13,、檢測前,要打開酶標儀,,使之穩(wěn)定10分鐘以上,。
14、底物有一定的毒性,,終止液對皮膚有腐蝕性,,應盡量避免接觸。
15,、待檢樣品要澄清,,否則會影響結果。

 ELISA試劑盒試驗原理:

試劑盒是固相ELISA試劑盒免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測,。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,,加入親和素標記過的HRP,。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,,然后加入底物A,、B,和酶結合物同時作用,。產生顏色,。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。

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