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大鼠ELISA試劑盒使用說明書的各大分類
閱讀:855 發(fā)布時間:2020-9-9樣本處理及要求:
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心,。
2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)該再次離心。
3.尿液:用無菌大鼠ELISA試劑盒管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行,。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量,。加入一定量的PBS,,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入大鼠ELISA試劑盒一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,,其余冷凍備用,。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同),、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上大鼠ELISA試劑盒待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,拍干,。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外。
溫育:操作同3,。
洗滌:操作同5,。
顯色:每孔大鼠ELISA試劑盒先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
38002-18-5 炔雌醇相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
536-33-4 乙硫異煙胺標(biāo)準(zhǔn)品 Ethionamide 200mg
1959/6/3 乙氧酰胺苯甲酯標(biāo)準(zhǔn)品 Ethopabate 125mg
4093-28-1 乙氧酰胺苯甲酯相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Ethopabate Related Compound A 25mg
77-67-8 乙琥胺標(biāo)準(zhǔn)品 Ethosuximide 500mg
86-35-1 乙苯妥英標(biāo)準(zhǔn)品 Ethotoin 200mg
452-35-7 乙氧苯噻唑胺標(biāo)準(zhǔn)品 Ethoxzolamide 200mg
141-78-6 乙酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)品 Ethyl Acetate 1.2ml×3ampules"
丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯共聚物水分散體標(biāo)準(zhǔn)品 " 1.5g
100-41-4 乙基苯標(biāo)準(zhǔn)品 Ethylbenzene 0.5ml×3ampules
基本原理:
1、抗原或抗體能吸附到固相載體表面,,并保持其免疫學(xué)活性,;
2,、抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,仍保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性,;
3,、 酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定大鼠ELISA試劑盒是否有免疫反應(yīng)的存在,,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例,,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果,。