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技術(shù)文章

大鼠ELISA試劑盒5點(diǎn)樣本收集保存方法

閱讀:753          發(fā)布時(shí)間:2020-9-29

大鼠ELISA試劑盒操作步驟:

1. 從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品大鼠ELISA試劑盒孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;

3. 待測(cè)樣本孔先加生物素10μL,再加待測(cè)樣本50μL,;

4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5 次(也可用洗板機(jī)洗板),。

6. 每孔加入底物A、B 各50μL,,37℃避光孵育15min,。

7. 每孔加入終止液50μL,15min 內(nèi),在450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD 值,。

大鼠ELISA試劑盒樣品收集,、處理及保存方法:

1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。

4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存:如果樣本大鼠ELISA試劑盒收集后不及時(shí)檢測(cè),,請(qǐng)按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

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