詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2,、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,100 U/L,,50 U/L,,25 U/L,12.5 U/L,,6.25 U/L,,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,其余濃度以此類推,。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml。
4,、 檢測稀釋液A:1×10ml,。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T | FS-02R6711 |
使用方法:
一,、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照,。 2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,,6,,5,4,3,,2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同),。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用。 | 二,、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,,必須設(shè)置N+2個提取, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),, 一個是NC(樣品制備陰性對照),。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此作為PC。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒,。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),,則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,,6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍,。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片,、SNP檢測,、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片,、LncRNA芯片,、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE,、SILAC,、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot,、Co-ip EMSA、CHIP,、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色,、組織切片,、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS,、LC-MS,、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型,、動物模型構(gòu)建
APC ELISA Kit 大鼠活化蛋白CMulti-class antibodies: 48T
Tie2 血管生成受體2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Glypican 4 磷脂?;嫉鞍拙厶?4抗體 0.2ml
ITF(Human Intestinal trefoil factor) ELISA Kit 人腸三葉因子 96T
NCKAP5 NCKAP5蛋白抗體 0.1ml
beta-Amyloid(25-35) β淀粉樣肽(25-35)抗體 0.1ml
Tie2 血管生成受體2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
ACA(Human centrol and centrosome antibody) ELISA Kit 人抗中性粒/中心體抗體Multi-class antibodies: 48T
IL-15 白介15抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh M Cadherin M鈣粘附分子抗體 0.1ml
ON(Human osteonectin) ELISA Kit 人骨粘連蛋白 96T
RBMY1F RNA結(jié)合蛋白片段Y染色體家族蛋白2抗體 0.2ml
CCR3 細(xì)胞表面趨化因子受體3抗體 0.1ml
IL-15 白介15抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit human IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗人IgG 0.5ml
GPR101 G蛋白偶聯(lián)受體101抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh albumin/AFM 人血清白蛋白抗體 0.2ml
Kv3.3/Kcnc3/FITC 熒光標(biāo)記離子通道蛋白Kv3.3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
SMC1/FITC 熒光標(biāo)記染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
動物組織基因組DNA快速提取試劑盒48T大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β蛋白22(TSC22)elisa檢測試劑盒
大鼠集聚蛋白(AGRN)elisa檢測試劑盒
大鼠c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)elisa檢測試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL/TNFSF10)elisa檢測試劑盒
大鼠高敏甲狀腺(U-T4)elisa檢測試劑盒
大鼠I型前膠原氨基端原肽(PINP)elisa檢測試劑盒
大鼠促甲狀腺胚胎因子(TEF)elisa檢測試劑盒
大鼠血小板膜糖蛋白IV (GP4/CD36)elisa檢測試劑盒
大鼠周期A1(CCNA1) elisa檢測試劑盒
大鼠信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄活因子3(STAT3)elisa檢測試劑盒
大鼠11-去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)elisa檢測試劑盒
大鼠血管緊張轉(zhuǎn)化 (ACE)elisa檢測試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)elisa檢測試劑盒
大鼠甘-N-甲基轉(zhuǎn)移(GNMT)elisa檢測試劑盒
大鼠因子Ⅷ(FⅧ)elisa檢測試劑盒
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀,。混勻后,,4℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度,。