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技術(shù)文章

  • 菌落總數(shù)即為食品檢樣經(jīng)過處理,,在一定條件下(如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間等)培養(yǎng)后,,所得每g(mL)檢樣中形成的微生物菌落總數(shù),。菌落總數(shù)主要作為判定食品被污染程度的標志,也可以應用這一方法觀察細菌在食...
    2018/3/21
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  • 分離純化處于重組蛋白表達的下游處理(downstreamprocessing)階段,,且與上游過程緊密相聯(lián),,如是否帶有親和標簽,是否進行分泌表達等,。所以在對目的蛋白表達純化時,,要統(tǒng)一考慮和整體設計,并充...
    2018/3/20
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  • 包涵體復性注意事項1)zui適pH值范圍為8.0-9.0之間,;2)溫度適宜選擇4℃,;3)復性過程蛋白濃度不宜過大,一般為0.1-0.2mg/mL,;4)復性時間一般為24-36小時,;5)低分子化合物如L...
    2018/3/20
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  • 1、外源DNA片段成功插到載體里面(PCR鑒定),,但無法表達蛋白一般判斷目的基因是否表達,,首先要進行SDS-PAGE檢測。跑膠的時候一定要設對照:Marker,,標準品陽性對照,,以及空白載體(誘導)和重...
    2018/3/19
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  • 1:通過His標簽純化的蛋白,雜帶比較多,,如何改進,?(1)如果純化的是上清,蛋白酶會部分降解目的蛋白,可通過加多種入蛋白酶抑制劑改進,。(2)可提高雜蛋白與鎳柱結(jié)合起始咪唑濃度,,以降低雜蛋白與鎳柱的親和...
    2018/3/19
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  • 固定化金屬離子親合層析(Immobilizedmetalionaffinitychromatography,IMAC),簡稱金屬螯合親合層析,,是一種新型的應用于原核蛋白純化的技術(shù),。該方法通過蛋白質(zhì)表面...
    2018/3/16
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  • 蛋白質(zhì)在分子生物學中的分類,大體上可分為天然蛋白和重組蛋白,。提取天然蛋白和構(gòu)建重組蛋白都需要先確定生物原材料,,如植物材料主要以植物的葉,胚,,果實和根莖等為主,;動物通常是選用實驗動物的器官和組織;而微生...
    2018/3/16
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  • 基本原理凝膠過濾色譜蛋白純化法,,又稱為空間排阻色譜,,分子篩等。其原理是應用蛋白質(zhì)分子量或分子形狀的差異來分離,。當樣品從色譜柱的頂端向下運動時,,大的蛋白質(zhì)分子不能進入凝膠顆粒從而被迅速洗脫;而較小的蛋白...
    2018/3/15
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  • WesternBlot原理WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質(zhì),,“探針”是抗體,,“顯色”用標記的二抗。SDS-PAGE可對蛋白質(zhì)樣品進行分離,,轉(zhuǎn)移到固相載體——例如硝酸纖...
    2018/3/15
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  • 一、分離純化的基本原理研究基因的表達和調(diào)控時常常要從組織和細胞中分離和純化RNA,。RNA質(zhì)量的高低常常影響cDNA庫,,RT-PCR和NorthernBlot等分子生物學實驗的成敗。Trizol是一種新...
    2018/3/14
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