蛋白芯片定制檢測(cè)服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作流程
實(shí)驗(yàn)技術(shù)簡(jiǎn)介:
蛋白芯片是一種高通量監(jiān)測(cè)系統(tǒng),,通過(guò)靶分子和捕捉分子相互作用來(lái)監(jiān)測(cè)蛋白分子之間的相互作用,。捕獲分子--般都預(yù)固定在芯片表面,由于抗體的高度特異性和與抗原強(qiáng)結(jié)合特性所以被廣泛的用做捕獲分子,。對(duì)于研究蛋白芯片的研究在芯片表面有效固定抗體是非常關(guān)鍵的,,特別是在固定抗體-致性方面非常關(guān)鍵對(duì)于增強(qiáng)蛋白芯片的靈敏度。G蛋白是一種抗體結(jié)合蛋白, 他特意結(jié)合抗體FC片段,因此已被廣泛的用于固定不同類型的抗體,。
實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理:
蛋白芯片技術(shù)的基本原理是將各種蛋白質(zhì)有序地固定于濾膜,、載玻片等各種載體上成為檢測(cè)用的芯片。然后,,用標(biāo)記了特定熒光素的抗體或其他成分與芯片反應(yīng),,經(jīng)清洗將未能與芯片上的蛋白質(zhì)互補(bǔ)結(jié)臺(tái)的成分洗去,再利用熒光掃描儀或激光共聚焦掃描技術(shù),,測(cè)定芯片上各點(diǎn)的熒光強(qiáng)度,,通過(guò)熒光強(qiáng)度分析芯片上成分與待檢溶液中成分之間相互作用的關(guān)系,,由此達(dá)到測(cè)定目的。
實(shí)驗(yàn)操作流程: .
1,、客戶提供生物樣品(抗原或者抗體),驗(yàn)收,。
2、配制點(diǎn)樣液,,使用Smartarrayer點(diǎn)樣儀進(jìn)行點(diǎn)樣,。
3、芯片固定,,若無(wú)后續(xù)實(shí)驗(yàn),,芯片交付客戶。
4,、芯片反應(yīng)實(shí)驗(yàn),。
5、芯片掃描及數(shù)據(jù)分析,。芯片清洗后,,用LuxScan 10K-A Cy3通道掃描,并提取數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,。
6,、提供結(jié)果報(bào)告(包括雜交圖片、數(shù)據(jù)結(jié)果及相應(yīng)聚類和差異分析等結(jié)果),。
客戶提供:
1,、實(shí)驗(yàn)對(duì)象為組織樣品,取適量(50-100mg) 新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,,使用
BioPulverizerTM冰凍粉碎組織,,加1m的RNA抽提試劑TRIzol (Invitrogen) ,使用Mini-Bead-Beater-16勻漿后抽提RNA。
2,、實(shí)驗(yàn)對(duì)象為細(xì)胞樣品,,每份樣品取1x106~ 1x107細(xì)胞,加1m的RNA抽提試劑TRIzol (樣品為貼壁細(xì)胞,,每10cm2培養(yǎng)皿TRIz0I使用量為1ml),,裂解后抽提RNA。
交付標(biāo)準(zhǔn):
1,、芯片檢測(cè)數(shù)據(jù)
2,、完整的實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(含軟件分析結(jié)果)以及實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):
實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
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| 染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
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