產(chǎn)品名稱：ELISA檢測試劑盒

Elisa實驗前的準(zhǔn)備

1仔細閱讀說明書

2確定試劑盒在有效期內(nèi)

3按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量、體積）

4標(biāo)本制備要規(guī)范,，每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備（貯存）,，盡量分裝做備份,。短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存

5準(zhǔn)備好所有實驗額外所需物品,，如試管,、吸頭、移液器,、離心機等

6根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量

7按說明書將所用試劑平衡至室溫,，配制所需試劑

DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南

8選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對；若選擇兩個單抗,，必須識別不同表位的抗體,；從同一家公司選擇抗體對。

9ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)實驗中進行彼此相抗的滴定,。同時,，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作,。

10標(biāo)準(zhǔn)品的配制：對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書,，注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前,，瞬時離心試劑瓶,，盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批說明書中的細節(jié),，將凍干的細胞因子復(fù)溶,。

11一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml?？衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒,、第三類試劑,、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。

12為了優(yōu)化靈敏度,，建議過夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本,。

13若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性,。

14當(dāng)測定混合液體中的抗原時，如血清,，建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.

ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù),，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷,。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,，認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異,、簡單,、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點,。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此，也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查,。本法不僅可以用來測定抗體,，而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法,。

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