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斑點(diǎn)Elisa有哪些優(yōu)點(diǎn)
閱讀:2039 發(fā)布時(shí)間:2014-5-14 相對(duì)與酶聯(lián)免疫試驗(yàn),,zui近我是發(fā)現(xiàn)了一種新型的免疫方法,為斑點(diǎn)免疫法,,此特點(diǎn) Dot-ELISA是由Hawkes等建立,。用吸附蛋白質(zhì)能力很強(qiáng)的硝酸纖維素膜(NC膜)為載體,將少量抗原(1~2μL)點(diǎn)加于膜上,,干燥后經(jīng)過(guò)封閉液處理,;滴加待檢血清和酶標(biāo)抗抗體(間接法),或是先在NC膜上滴加待檢血清(2~5tzL),,干燥后加封閉液處理,;滴加特異性抗原和酶標(biāo)抗體(雙抗體夾心法)進(jìn)行反應(yīng)。
洗滌后滴加能形成不溶性有色沉淀的底物溶液(HRP常用二氨基聯(lián)苯胺,、4-氯乙萘酚),。陽(yáng)性反應(yīng)在膜上出現(xiàn)肉眼可見的著色斑點(diǎn),。Dot-ELISA常用于篩選單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞;在各種病毒性疾病和寄生蟲病的臨床診斷與血清流行病學(xué)調(diào)查中亦廣泛使用,。
根據(jù)恒遠(yuǎn)試驗(yàn)得出此法具有以下優(yōu)點(diǎn):
①特異性強(qiáng),假陽(yáng)性較少,;
②敏感性高,,NC膜對(duì)蛋白質(zhì)的吸附性能優(yōu)于聚苯乙烯,可檢出lng抗腺病毒IgC,;檢出抗原的敏感性較常規(guī)ELISA法高6~8倍;
③試劑用量少,比ELISA法至少節(jié)約10倍,;
④操作簡(jiǎn)便快速,,不需要特殊設(shè)備條件,適合基層單位使用,;
⑤抗原膜保存期長(zhǎng),,—20%可保存半年,不影響其活性,;并可郵寄供現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查使用,;
⑥檢測(cè)結(jié)果可長(zhǎng)期保存,便于復(fù)查,。