甘油三酯（ TG） 含量檢測試劑盒

注意：正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定,。

試劑內(nèi)容：

可見分光光度法

試劑一：自備,，取 100 mL 玻璃空瓶，加入 45mL 正庚烷,，45mL 異丙醇,，蓋緊后混勻，4℃保存,。

試劑二：液體 7mL×1 瓶,，4℃保存。試劑三：液體 30mL×1 瓶,，4℃保存,。

試劑四：液體 10mL×1 瓶，4℃避光保存,。試劑五：液體 30mL×1 瓶,，4℃避光保存。試劑六：液體 30mL×1 瓶,，4℃避光保存,。

標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 瓶，臨用前加 5mL 試劑一,，即 1mg/mL 甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)溶液,，4℃保存。

產(chǎn)品說明：

TG 是長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,，不僅是細(xì)胞膜的主要成分,，也是重要呼吸底物。 測定原理： 用異丙醇抽提取 TG，KOH 皂化 TG 后水解生成甘油及脂肪酸,，過碘酸氧化甘油生成甲醛,， 在氯離子存在下甲醛與乙酰丙酮縮合生成黃色物質(zhì)，在 420 nm 有特征吸收峰,，其顏色的深淺與 TG 含量成正比。

自備儀器和用品：

可見分光光度計(jì),、水浴鍋,、可調(diào)式移液槍、1mL 玻璃比色皿,、雙蒸水和 100mL 玻璃空瓶,。

操作步驟:

一、TG 的提?。?/span>

1,、 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL 試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿,，8000g,，4℃離心10min，取上清待測,。

2,、 細(xì)胞、細(xì)菌：先收集 400-500 萬細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),，棄上清,，加 1mL 試劑一，超聲波破碎

1min（強(qiáng)度 20％,，超聲 2s,，停 1s），8000g,， 4℃離心 10min,，取上清待測。

3,、 血清（漿）等液體樣品：直接測定,。二、測定操作：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min,，調(diào)節(jié)波長到 420 nm,，蒸餾水調(diào)零。

2. 水浴鍋預(yù)熱到 65℃,。

加試劑一后充分混勻,，再加試劑二，劇烈振蕩 30s,，靜置,，待分層后取上層溶液 75µL,，置于新的 EP 管中。

3. 甘油三酯含量測定：

取出 EP 管，待冷卻后,，于 420nm  處比色,，記為 A 空，A 標(biāo)和 A 測,。注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次,。

三、計(jì)算公式：

1. 血清（漿）中甘油三酯含量：

TG 含量（mg/dL）=C  標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）×100

=100×（A 測－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）

C 標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品濃度,，1mg/mL,；100：單位換算系數(shù)，1dL=100 mL,。

2. 組織中甘油三酯含量：

(1) 按樣本蛋白濃度計(jì)算

TG 含量（mg/mg prot）= C 標(biāo)準(zhǔn)品×V×（A 測－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷（Cpr ×V）

=（A 測－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷ Cpr

(2) 按樣本鮮重計(jì)算

TG 含量（mg/g 鮮重）=C  標(biāo)準(zhǔn)品×V×（A 測－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷W

=（A 測－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷ W

C 標(biāo)準(zhǔn)品：1mg/mL ,；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL,；W：樣本鮮重,，g ;V：加入試劑一的體積， 1mL,。

3. 細(xì)胞,、細(xì)菌中甘油三酯含量：

TG 含量（mg/104 cell）=C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷細(xì)菌或細(xì)胞密度

=（A 測－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷細(xì)菌或細(xì)胞密度

C 標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品濃度，1mg/mL,；細(xì)菌或細(xì)胞密度：104 cell/mL

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中有易揮發(fā)性物質(zhì),，實(shí)驗(yàn)過程中需佩戴手套和口罩，試劑瓶蓋打開后應(yīng)該及時(shí)蓋緊,。

2. 加試劑二后需劇烈震蕩,，使待測液中甘油三酯得到充分提取。

3. 檢出限為 100µ mol/L,。

上海語純生物科技有限公司,，是由具有*生命科學(xué)、生物技術(shù)背景人員共同創(chuàng)辦的技術(shù)企業(yè),。公司專注于原代細(xì)胞,、腫瘤細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑產(chǎn)品，為高校,、食品,、醫(yī)藥、生物研究等領(lǐng)域提供相關(guān)技術(shù)支持和服務(wù)。

公司自成立以來通過不斷地科技創(chuàng)新,，產(chǎn)品研發(fā),，已為客戶提供定制化細(xì)胞產(chǎn)品以及完整的細(xì)胞培養(yǎng)解決方案，通過積極地探索,、研發(fā),、深化和豐富產(chǎn)品，目前基礎(chǔ)培養(yǎng)基產(chǎn)品種類多達(dá)200多種,，細(xì)胞系300多種,，原代細(xì)胞接近600種。我們始終以“發(fā)展科學(xué)技術(shù),，關(guān)愛公眾生命健康”為動(dòng)力，通過技術(shù)創(chuàng)新,，廣泛吸納高科技人才,，不斷完善產(chǎn)品體系、豐富產(chǎn)品鏈,，積極拓展市場,，擴(kuò)充應(yīng)用領(lǐng)域，,，建立了具有市場競爭力的“語純”品牌,。

注意事項(xiàng)

1、為了您的安全和健康,，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套及口罩操作,；

2、為保持本產(chǎn)品的優(yōu)良使用效果,，請務(wù)必按照建議的儲(chǔ)存條件進(jìn)行保存,；

3、本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用,，不可用于臨床診斷或治療,。

甘油三酯（ TG） 含量檢測試劑盒