總膽固醇（TC）含量檢測試劑盒

產(chǎn)品簡介：

總膽固醇（Total Cholesterol,，TC）是指所有脂蛋白所含膽固醇的總和,，包括游離膽固醇和膽固醇酯,。

利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇（FC）和游離脂肪酸（FFA），從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為 FC,；進一步利用膽固醇氧化酶催化 FC 氧化,，生成△4-膽甾烯酮和 H₂O₂；最后利用過氧化物酶催化H₂O₂ 氧化 4-氨基安替比林和酚,，生成紅色醌類化合物,，其在 500nm 有特征吸收峰，其顏色深淺與TC 含量成正比,。

試驗中所需的儀器和試劑：

可見分光光度計/酶標(biāo)儀,、天平、低溫臺式離心機,、微量玻璃比色皿/96 孔板,、可調(diào)式移液槍、

EP 管,、蒸餾水,、異丙醇。

產(chǎn)品內(nèi)容：

提取液：異丙醇 100mL×1 瓶,，自備,，4℃保存； 工作液：液體 30mL×1 瓶,，4℃保存,；

標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1支，10mg 膽固醇,，4℃保存,。臨用前加入517μL提取液，振蕩溶解,，即為50μmol/mL 的膽固醇標(biāo)準(zhǔn)溶液,。

操作步驟：

一、樣本處理：

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織,，加入 1mL

提取液）進行冰浴勻漿,。10000g，4℃離心 10min,，取上清置冰上待測,。

2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104 個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)胞加入 1mL 提取液）,，冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w,，超聲 2 秒，間隔 3 秒,，總時間 3min）,；然后 10000g,，4℃離心 10min，取上清置于冰上待測,。

3. 血清（漿）樣品：直接測定,。二、測定步驟：

1,、 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,，調(diào)節(jié)波長至 500nm，蒸餾水調(diào)零,。

2,、 將 50μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液用提取液稀釋為 2.5、1.25,、0.625,、0.3125、0.15625,、0.078μmol/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用,。

3、 操作表：(在離心管或 96 孔板中依次加入下列試劑)

總膽固醇含量計算

一,、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：

以各個標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為 x 軸,，其對應(yīng)的△A 標(biāo)準(zhǔn)為 y 軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,，得到標(biāo)準(zhǔn)方程 y=kx+b,， 將△A 帶入方程得到 x（μmol/mL）

二、總膽固醇含量的計算：

1. 血清（漿）中 FC 含量計算： TC 含量（μmol/dL）=x×100,。

2. 組織中 FC 含量計算：

1. 按樣本蛋白濃度計算

TC 含量（μmol/mg prot）=x×V 提取÷（Cpr×V 提?。?/span>=x÷Cpr。

2. 按樣本鮮重計算

TC 含量（μmol/g 鮮重）=x×V 提取÷W= x÷W

3. 細(xì)胞,、細(xì)菌中 TC 含量計算：

TC 含量(μmol/104 cell)=x×V 提取÷500=0.002x,。

100：1dL=100mL；V 提?。杭尤霕颖镜奶崛∫后w積,，1mL,；W：樣本質(zhì)量，g,；500:500 萬個細(xì)胞數(shù)量,。

注意事項

當(dāng)△A 大于 1.5 時，建議將樣本用提取液稀釋后再進行測定,。

上海語純生物科技有限公司,，是由具有*生命科學(xué)、生物技術(shù)背景人員共同創(chuàng)辦的技術(shù)企業(yè),。公司專注于原代細(xì)胞,、腫瘤細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑產(chǎn)品，為高校,、食品,、醫(yī)藥、生物研究等領(lǐng)域提供相關(guān)技術(shù)支持和服務(wù),。

公司自成立以來通過不斷地科技創(chuàng)新,，產(chǎn)品研發(fā)，已為客戶提供定制化細(xì)胞產(chǎn)品以及完整的細(xì)胞培養(yǎng)解決方案,，通過積極地探索,、研發(fā)、深化和豐富產(chǎn)品,，目前基礎(chǔ)培養(yǎng)基產(chǎn)品種類多達200多種,，細(xì)胞系300多種，原代細(xì)胞接近600種,。我們始終以“發(fā)展科學(xué)技術(shù),，關(guān)愛公眾生命健康”為動力，通過技術(shù)創(chuàng)新,，廣泛吸納高科技人才,，不斷完善產(chǎn)品體系、豐富產(chǎn)品鏈,，積極拓展市場,，擴充應(yīng)用領(lǐng)域，,，建立了具有市場競爭力的“語純”品牌,。

注意事項

1、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套及口罩操作,；

2、為保持本產(chǎn)品的優(yōu)良使用效果，請務(wù)必按照建議的儲存條件進行保存,；

3,、本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療,。

總膽固醇（TC）含量檢測試劑盒