真菌幾丁質（Chitin）ELISA試劑盒

樣品收集、處理及保存方法,；

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后,，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000轉離心30分鐘取上清,。

3.  細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉離心10分鐘取上清,。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測,，請按一次用量分裝，凍存于-20℃,，避免反復凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品,；

1.酶標儀（450nm）

2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL、20-200uL,、200-1000uL

3.37℃恒溫箱

操作注意事項,；

1.   試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘,。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,，這屬于正常現(xiàn)象,，水浴加熱使結晶溶解后再使用,。

2.   實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存,。

3.   按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍,，最終結果乘以5才是樣本實際濃度。

4.   嚴格按照說明書中標明的時間,、加液量及順序進行溫育操作,。

5.   所有液體組分使用前充分搖勻。

真菌幾丁質（Chitin）ELISA試劑盒組成,；

真菌幾丁質（Chitin）ELISA試劑盒組成 96孔配制 48孔配制 備注 

微孔酶標板 12孔*8條 12孔*4條 無 

標準品 0.3ml*6管 0.3ml*6管 無 

樣本稀釋液 6ml 3ml 無 

檢測行體-HRP 10ml 5ml 無 

20*洗滌緩沖液 25ml 15ml 按照說明書進行稀釋 

底物A 6ml 3ml 無 

底物B 6ml 3ml 無 

終止液 6ml 3ml 無 

封板膜 2張 2張 無 

說明書 1份 1份 無 

自封袋 1個 1個 無 

注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0,、2.5、5,、10,、20、40 ng/mL

試劑的準備

 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋,，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水,。

洗板方法

1.  手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,，在吸水紙上拍干，如此洗板5次,。

  自動洗板機：每孔注入洗液350μL,，浸泡1min，洗板5次。

操作步驟,；

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；

3.  樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL,；空白孔不加,。

4.  除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的競爭抗原50μL,，用封板膜封住反應孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液，靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）,。

6. 每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。

7.  每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值,。

結果判斷；

 繪制標準曲線：在Excel工作表中,，以標準品濃度作橫坐標,，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線,，按曲線方程計算各樣本濃度值,。

試劑盒性能

1. 準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值，大于等于0.9900,。

2. 靈敏度：檢測濃度小于10μg/mL,。

3. 檢測范圍：10-2400μg/mL。

4. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應,。

5. 重復性：板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%。

6. 貯藏：2-8℃,，避光防潮保存,。

7. 有效期：6個月

上海語純生物科技有限公司,，是由具有*生命科學、生物技術背景人員共同創(chuàng)辦的技術企業(yè),。公司專注于原代細胞,、腫瘤細胞及細胞培養(yǎng)相關試劑產(chǎn)品，為高校,、食品,、醫(yī)藥、生物研究等領域提供相關技術支持和服務,。

公司自成立以來通過不斷地科技創(chuàng)新,，產(chǎn)品研發(fā)，已為客戶提供定制化細胞產(chǎn)品以及完整的細胞培養(yǎng)解決方案,，通過積極地探索,、研發(fā)、深化和豐富產(chǎn)品,，目前基礎培養(yǎng)基產(chǎn)品種類多達200多種,，細胞系300多種，原代細胞接近600種,。我們始終以“發(fā)展科學技術,，關愛公眾生命健康”為動力，通過技術創(chuàng)新,，廣泛吸納高科技人才,，不斷完善產(chǎn)品體系、豐富產(chǎn)品鏈,，積極拓展市場,，擴充應用領域，,，建立了具有市場競爭力的“語純”品牌,。

注意事項

1、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套及口罩操作,；

2、為保持本產(chǎn)品的優(yōu)良使用效果,，請務必按照建議的儲存條件進行保存,；

3、本產(chǎn)品僅供科學研究或進一步生產(chǎn)使用,，不可用于臨床診斷或治療,。

真菌幾丁質（Chitin）ELISA試劑盒