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M-1細(xì)胞 M-1 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)/STR鑒定

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訂貨量 ≥1
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鏡像綺點(diǎn)(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司(子公司賽百慷)( Cellverse(iCell) Bioscience Technology Co., Ltd. )是一家專注于研發(fā)生產(chǎn)高品質(zhì)原代細(xì)胞、細(xì)胞系,、干細(xì)胞以及相關(guān)生物學(xué)試劑,,并提供專業(yè)生物醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)外包的高新技術(shù)企業(yè),公司總部位于上海,。

鏡像綺點(diǎn)專注于研發(fā)生產(chǎn)高品質(zhì)的人體組織源及動物組織源的原代細(xì)胞,、細(xì)胞系、iPS細(xì)胞等產(chǎn)品,,提供以及相關(guān)的CRO,,CMO服務(wù),,同時也為客戶提供相關(guān)培養(yǎng)體系,培養(yǎng)基等試劑,。在中國,,鏡像綺點(diǎn)除與中國科學(xué)院細(xì)胞庫合作外,還與各地醫(yī)學(xué)學(xué)院,、機(jī)構(gòu),、藥企合作,其中包括:上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院,,復(fù)旦大學(xué)醫(yī)學(xué)院,。
目前,鏡像綺點(diǎn)已經(jīng)建立起先進(jìn)完備的“人類組織源原代細(xì)胞庫和細(xì)胞系庫”兩大細(xì)胞資源庫,,各種種屬源細(xì)胞株(系)500多種,,原代細(xì)胞包括人源、鼠源,、兔源,、豬源、羊源以及其它動物源近700多種,,3000多株現(xiàn)貨,,引進(jìn)了生命科學(xué)領(lǐng)域的全套實(shí)驗(yàn)設(shè)備,建立了先進(jìn)的生產(chǎn)研發(fā)實(shí)驗(yàn)室,,采用了先進(jìn)的行業(yè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn),、制造工藝、質(zhì)檢流程,,保證了產(chǎn)品出廠的品質(zhì),,公司同時更注重產(chǎn)品售前與售后的技術(shù)服務(wù),著重滿足客戶的需求與體驗(yàn),。還申請了相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)試劑等十幾項(xiàng)zhuan利產(chǎn)品,。正是憑借原有的原代細(xì)胞領(lǐng)域原創(chuàng)技術(shù)的優(yōu)勢,鏡像綺點(diǎn)(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司,,已經(jīng)成為國內(nèi)外眾多生物醫(yī)藥企業(yè)誠信的合作伙伴和堅(jiān)強(qiáng)的技術(shù)后盾,。

鏡像綺點(diǎn)(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司

上海市奉賢區(qū)茂園路260號臨港南橋科技城56號樓7層













原代細(xì)胞、細(xì)胞系,、ips細(xì)胞以及各種CRO實(shí)驗(yàn)服務(wù)

供貨周期 一周 規(guī)格 1*10^6
主要用途 科研用途

M-1 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)/STR鑒定

細(xì)胞介紹

該細(xì)胞源于tg(SV40E)Bri7轉(zhuǎn)基因小鼠的正常腎組織,,含SV40病毒的DNA序列,保留了皮質(zhì)集合管的某些特性,,如形態(tài)和CCD(皮質(zhì)結(jié)合管)抗原,。大多M-1細(xì)胞的克隆具有皮質(zhì)集合管中閏細(xì)胞或主細(xì)胞的特征;5%~10%的細(xì)胞有閏細(xì)胞和主細(xì)胞的雙重表型,。當(dāng)該細(xì)胞在滲透性支持物上生長時,,可形成具有負(fù)跨膜電位差的腔樣結(jié)構(gòu),。

細(xì)胞特性

1) 來源:小鼠 腎

2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長

3) 含量:>1x106  細(xì)胞數(shù)

4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用,。

運(yùn)輸和保存

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系,。

(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的處理

1)收到細(xì)胞后,,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),,同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù),。

3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況,。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完quan培養(yǎng)基6-8mL,,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理,。傳代過程中,,若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完quan培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞,。  收到細(xì)胞后一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。

M-1 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)/STR鑒定

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備

1) 準(zhǔn)備DMEM/F-12(推薦iCell-0005)培養(yǎng)基 添加:0.005mM地塞米song,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,5%;雙抗,,1%,。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二.細(xì)胞處理:

1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入到含4-6mL完quan培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,,棄去上清液,,完quan培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完quan培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜,。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度,。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法

1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白mei-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化直至細(xì)胞層分散(通常在 5 至 15 分鐘內(nèi))以使培養(yǎng)基達(dá)到正常 pH 值(7.0 至 7.6),,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,為避免結(jié)塊,在等待細(xì)胞分離時請勿敲擊或搖動燒瓶來攪動細(xì)胞,。難以分離的細(xì)胞可置于37°C以利于分散,。若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化,。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的wan全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

下面T25瓶為例,;

1. 細(xì)胞凍存時按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),來決定細(xì)胞的凍存密度,。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個活細(xì)胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,,按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個活細(xì)胞/ml分配到一個凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,,標(biāo)注好名稱、代數(shù),、日期等信息,。

3. 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存,。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項(xiàng)

1.收到細(xì)胞后,,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,,請立即與我們聯(lián)系,。

2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,,200*各一張),,觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù),。

3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境,、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),,故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,,期間間隔時間不能大于7天。

4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。



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