小鼠腎腺癌細(xì)胞的培養(yǎng)方法及注意事項(xiàng)

來源：鏡像綺點(diǎn)（上海）細(xì)胞技術(shù)有限公司 2025年02月18日 15:30

　　小鼠腎腺癌細(xì)胞的培養(yǎng)方法及注意事項(xiàng)概述如下：

　　在培養(yǎng)小鼠腎腺癌細(xì)胞時(shí),，首先需要準(zhǔn)備適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,，通常使用的是DMEM（高糖）培養(yǎng)基，并添加10%的胎牛血清（FBS）以及必要的抗生素,，如青霉素和鏈霉素（P/S）,，以防止細(xì)菌污染。細(xì)胞應(yīng)在含有95%空氣和5%二氧化碳的培養(yǎng)箱中,，于37℃恒溫條件下進(jìn)行培養(yǎng),。

　　收到細(xì)胞后，應(yīng)首先檢查細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否破損，培養(yǎng)液是否有漏出或渾濁現(xiàn)象,。確認(rèn)無誤后,，用75%的酒精對(duì)培養(yǎng)瓶表面進(jìn)行消毒，然后將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中靜置24小時(shí),，使細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定,。在顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%90%時(shí),，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

　　傳代時(shí)，應(yīng)先棄去舊的培養(yǎng)基,，用不含鈣,、鎂離子的PBS溶液潤洗細(xì)胞12次。然后加入適量的胰酶消化液,，置于培養(yǎng)箱中消化12分鐘，待細(xì)胞大部分變圓并脫落后,，加入含血清的培養(yǎng)基終止消化,。將細(xì)胞懸液離心后，棄去上清液,，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，并按適當(dāng)?shù)谋壤值叫碌呐囵B(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

　　在培養(yǎng)過程中,，需要注意定期更換培養(yǎng)基,，通常建議每周更換2~3次。同時(shí),，應(yīng)定期觀察細(xì)胞生長狀態(tài),，記錄細(xì)胞形態(tài)、密度等信息,。當(dāng)細(xì)胞生長至一定數(shù)量時(shí),，可考慮進(jìn)行凍存，以便后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用,。

　　總之,，小鼠腎腺癌細(xì)胞的培養(yǎng)需要嚴(yán)格的無菌操作、適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件和定期的觀察記錄,，以確保細(xì)胞的健康生長和實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行,。

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