sv-huc-1人正常膀胱上皮細胞

(SV-HUC-1)

細胞介紹

這株細胞是正常輸尿管組織用SV40病毒轉(zhuǎn)染建株的,。反復用非洲綠猴腎細胞平 板測試檢測傳染性SV40的生成,，結(jié)果都呈陰性。

細胞特性

1)來源：膀胱

2)形態(tài)：上皮細胞

3)含量：>lxl06 個/mL

4)污染：支原體,、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性

5)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝

運輸和保存：使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞。收到細胞后,， 可在1000RPM,，常溫條件下，離心5min后,，于潔凈操作臺棄去上清,，加入推薦 使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至l〇cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達到細胞生長 狀態(tài)良好時，再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟,。

細胞用途：僅供科研使用。

sv-huc-1人正常膀胱上皮細胞

細胞培養(yǎng)步驟

1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1.準備 F-12K 培養(yǎng)基（GIBCO,，21127-022),，90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。

2.培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳,，5%,。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱 濕度為70%-80%,。

3. 凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。

2)細胞處理：

復蘇細胞：將含有l(wèi)mL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,，加 入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補 加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入l〇cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢 查細胞密度,。

細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：

棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。

力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,，置于37°C培

養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部 分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止 消化,。

按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分 鐘，棄去上清液,，補加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者

細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,，棄 去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后,，加入約lml含血清的培養(yǎng)基后 加入凍存管中,，再添加1〇%DMSO后進行凍存。

注意事項：

收到細胞后,，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,，請立 即與我們聯(lián)系,。

所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,，并請注 意防護,，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

瓶中,。