實驗原理：
人B細胞活化因子受體(BAFF-R)Elisa試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本水平,。用純化的轉(zhuǎn)移酶水解酶（XTH）捕獲抗體包被微孔板,，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入,，再與HRP標記的檢測抗體結(jié)合,，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，通過標準曲線計算樣品中含量。

?本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿,、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中的活性。
?有效期：6個月
?保存條件：2-8℃
?僅供科研使用,，不得用于臨床診斷
檢測前準備工作：
1.請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,，平衡至室溫。
2.從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,，屬于正?，F(xiàn)象；放置室溫,，輕搖均勻,，待結(jié)晶*溶解后再配置洗滌液?？蓪?0ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成500ml工作濃度的洗滌液,，未用完的放回4℃
3.20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水,。
實驗所需自備試驗器材：
1.酶標儀（450nm）
2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL、20-200uL,、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
4.蒸餾水或去離子水
人B細胞活化因子受體(BAFF-R)Elisa試劑盒組成：
備注：
1.（96T/48T）打開包裝后請及時檢查所有物品是否齊全,。
2.標準品濃度依次為：200、100,、50,、25、12.5,、0 mU/mL

樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,，保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時,，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
5. 組織標本：切割標本后,，稱取重量。加入一定量的PBS,，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用,。
6. 標本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
人B細胞活化因子受體(BAFF-R)Elisa試劑盒注意事項：
1.嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑,。
2.洗板不正確可以導(dǎo)致不準確的結(jié)果,。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉,。
3.消除板底殘留的液體和手指印,，否則影響OD值,。
4.底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,，已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5.避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果,。
6.在儲存和溫育時避免強光直接照射,。
7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8.任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體,。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性,。
9.不能使用過期產(chǎn)品,不同批號組分不得混用。
10.如果可能傳播疾病,，所有的樣品都應(yīng)管理好,，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
操作步驟：
1.標準品的加樣：設(shè)置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；。
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）,、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。
3.加酶：每孔加入酶標試劑100μl，空白孔除外,。
4.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘,。
5.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
6.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次，拍干。
7.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
8.終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。
9.測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。
計算：
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標,，    
在坐標紙上繪出標準曲線,，根據(jù)樣品的OD      
值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋      
倍數(shù),；或用標準物的濃度與OD值計算出標      
準曲線的直線回歸方程式,，將樣品的OD值                   
代入方程式，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋       （此圖僅供參考） 
倍數(shù),，即為樣品的實際濃度。                                 
試劑盒性能：
1.檢測范圍：6.25 mU/mL - 200 mU/mL
2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和11%靈敏度：zui低檢測濃度小于1.0 mU/mL   

人B細胞活化因子受體(BAFF-R)Elisa試劑盒性能：
1.檢測范圍：6.25 mU/mL - 200 mU/mL
2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和11%
靈敏度：zui低檢測濃度小于1.0 mU/mL