A-427 (人肺癌細(xì)胞)
參考價(jià) | ¥ 2500 |
訂貨量 | ≥1瓶 |
- 公司名稱(chēng) 上海信裕生物科技有限公司
- 品牌 信裕生物
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地 中國(guó)/美國(guó)/德國(guó)
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/4/10 17:18:27
- 訪問(wèn)次數(shù) 843
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Elisa試劑盒,,試劑盒,,抗體,細(xì)胞,,血清,,生化試劑,生物培養(yǎng)基,,實(shí)驗(yàn)耗材等科研產(chǎn)品
純度 | 99.99% | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
---|---|---|---|
規(guī)格 | 1*10^6cells/T25方瓶 | 貨號(hào) | XY-H786 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁 | 主要用途 | 僅用于科研 |
A-427 (人肺癌細(xì)胞)
一,、細(xì)胞基本屬性 | ||||
細(xì)胞名稱(chēng) | A-427人肺癌細(xì)胞 | |||
細(xì)胞別稱(chēng) | A427;A-427,;人肺癌細(xì)胞 | |||
種屬來(lái)源 | 人 | |||
種屬來(lái)源 | 男,;52歲 | |||
組織來(lái)源 | 肺 | |||
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) | |||
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | |||
細(xì)胞代數(shù) | 10代以?xún)?nèi) | |||
背景介紹 | A-427細(xì)胞系由Giard DJ建立,源自一位52歲的肺癌男性白人患者,。 | |||
生物安全等級(jí) | 1 | |||
細(xì)胞規(guī)格 | 1x106cells/T25或1mL凍存管 | |||
支原體檢測(cè) | 無(wú) | |||
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-7906 ATCC; HTB-53 DSMZ; ACC-234 | |||
培養(yǎng)基 | MEM-EBS+10%FBS | |||
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ | |||
凍存條件 | 無(wú)血清凍存液,,液氮儲(chǔ)存 | |||
倍增時(shí)間 | ~40-70 hours | |||
致瘤性 | Yes, in nude mice; forms an undifferentiated tumor suggestive of adenocarcinoma. |
二,、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主
將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過(guò)夜),。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,,用PBS清洗細(xì)胞一次;
b,、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
c,、棄上清,,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,,最后放入37℃,,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
d,、待細(xì)胞貼壁后,,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代,。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例,;
a,、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,,用PBS清洗細(xì)胞一次,;
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,,倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,,1000rpm離心5min;
c,、用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,,并放置于凍存管中;
d,、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,,然后將其移入-80℃過(guò)夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存,。使用程序降溫盒可直接放入-80℃,。
三、培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,,責(zé)任由 客戶(hù)自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h,。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng),。
6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流,。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,,告知細(xì)胞 的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用,。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 ,。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿,。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿,。
僅用于科研,不能用于臨床診斷,!所有產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于人或動(dòng)物的治療等任何其他用途,不為任何個(gè)人提供產(chǎn)品和服務(wù),。以實(shí)際收貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn),,網(wǎng)站說(shuō)明書(shū)僅供參考。