間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒

,成骨誘導(dǎo)液

貨號：YJ-MSCYD-002

價格： 1280.0

規(guī)格： 100ml    200ml

產(chǎn)品描述

本產(chǎn)品為團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化的間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒,，可增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的能力,。

本產(chǎn)品僅用于科研用途,，不可用于診斷,、治療,、臨床,、家庭及其他用途,。

產(chǎn)品組成成分及保存

注意：1.為保證產(chǎn)品的有效性,，請避免反復(fù)凍融,。

2. 配制好的誘導(dǎo)培養(yǎng)基保存于2-8℃，有效期為2周,，請根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量合理配制,。

產(chǎn)品使用說明

1. 間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基的配制

① 室溫條件下融化添加劑及血清。（注意：若添加劑或血清中有沉淀物,，屬正?，F(xiàn)象，無須過濾,，避免成分丟失,。）

② 根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量，于無菌操作臺中配制完全培養(yǎng)基,，建議每次配制50mL,，先加細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基和胎牛血清，再加誘導(dǎo)分化添加劑,。（配制比例見表一）

                                                                                 表一

2. 間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)步驟

①包被細(xì)胞培養(yǎng)瓶/板：向細(xì)胞培養(yǎng)器皿中加入0.1%明膠溶液,，輕微晃動，使包被液完全覆蓋培養(yǎng)器皿底面,，置于37℃培養(yǎng)箱中孵育30min,，吸除液體即可使用。

②建議取第3~5代,、純度達(dá)90%以上,、狀態(tài)良好的間充質(zhì)干細(xì)胞，將其消化收集,，使用含10%FBS的完全培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞濃度,，均勻鋪于包被好的培養(yǎng)瓶/板中，置于37℃,，5%CO2，飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。（細(xì)胞接種詳情參考表二）

                                                       表二

③待細(xì)胞匯合度達(dá)約90%時,，即可進(jìn)行誘導(dǎo)分化。

④小心吸棄細(xì)胞培養(yǎng)上清,，沿孔壁緩慢加入提前配制好的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基,，置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

（注意：完全培養(yǎng)基加入細(xì)胞前需提前置于37℃預(yù)熱。）

⑤每2~3day換用新鮮的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基,。換液時,，若細(xì)胞培養(yǎng)上清顏色變?yōu)槌吻宓狞S色，是由于細(xì)胞量較大,，營養(yǎng)消耗較快導(dǎo)致的,，請及時縮短換液周期。

⑥細(xì)胞誘導(dǎo)2~4周后,，即可進(jìn)行茜素紅染色鑒定,。（注意：請?jiān)陲@微鏡下確認(rèn)鈣結(jié)節(jié)形成后，再進(jìn)行染色鑒定,。）

3. 茜素紅染色分析

① 細(xì)胞誘導(dǎo)分化結(jié)束后,，小心吸棄細(xì)胞培養(yǎng)上清，1×PBS潤洗1~2次,，室溫固定30 min,。（細(xì)胞固定液為4%中性甲醛溶液等，體積參考表二）

② 吸棄細(xì)胞固定液,，1×PBS潤洗2次,。沿孔壁緩慢加入茜素紅染色液，染液體積請參考表二,，室溫染色30min,。（注意：染色液底部可能會有沉淀，吸取時盡量不要觸及底部,。若細(xì)胞染色后有沉淀,，1×PBS洗去即可。）

③ 吸出染色液,，1×PBS潤洗,，去掉浮色。顯微鏡下觀察細(xì)胞染色效果,，鈣鹽呈較深的橙紅色,。（注意：染色液可重復(fù)使用，建議收集,。）

質(zhì)量控制

無菌檢測（細(xì)菌,、真菌和支原體檢測）

pH測試

滲透壓檢測

內(nèi)毒素

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間充質(zhì)干細(xì)胞

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l PBS緩沖液,，貨號：YJ-0800  

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

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