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離子色譜利劍出鞘,,輕松解決低聚半乳糖檢測(cè)難題

閱讀:340      發(fā)布時(shí)間:2022-11-7
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低聚半乳糖(Galactooligosaccharides,GOS)是一種具有天然屬性的功能性低聚糖,,其分子結(jié)構(gòu)一般是在半乳糖或葡萄糖分子上連接1~7 個(gè)半乳糖基,,即Gal-(Gal)n-Glc/Gal(n 為0-6)。

低聚半乳糖是人體腸道中雙歧桿菌,、嗜酸乳酸桿菌等有益菌的營養(yǎng)源和增殖因子,,可以改善人體腸道的消化吸收功能。新生兒的消化功能比較薄弱,,所以嬰幼兒奶粉中都添加了低聚半乳糖的營養(yǎng)成分,,不但能改善寶寶的消化功能,還能促進(jìn)寶寶體內(nèi)鈣的吸收,,從而增強(qiáng)寶寶免疫力,。

 

中華人民共和國衛(wèi)生部2008年第20號(hào)公告批準(zhǔn)低聚半乳糖為新資源食品,作為一種新的功能性食品,,低聚半乳糖在我國將具有廣闊的市場(chǎng)前景,。因此,關(guān)于低聚半乳糖的檢測(cè)需求也持續(xù)增長,。

 

低聚半乳糖極性強(qiáng),,并且是不同聚合度糖的混合物,這對(duì)色譜柱的保留和分離能力提出了挑戰(zhàn),,常規(guī)色譜柱一般難以實(shí)現(xiàn),;此外,低聚半乳糖無紫外吸收,,示差檢測(cè)器可進(jìn)行測(cè)定,,但靈敏度不高,因此對(duì)低聚半乳糖的高靈敏度檢測(cè)也是面臨的另一個(gè)難題,。

 

1

低聚半乳糖原料的測(cè)定

Determination of galactooligosaccharide

raw materials

2022年6月30日發(fā)布食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)《食品營養(yǎng)強(qiáng)化劑 低聚半乳糖》,,此標(biāo)準(zhǔn)2022年12月30日實(shí)施。標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)于低聚半乳糖含量的測(cè)定規(guī)定了兩種檢測(cè)方法,,高效液相色譜雙柱法和高效離子交換色譜法,,其中離子色譜法為仲裁法

圖片2.png

△Dionex™ ICS-6000多功能高壓離子色譜儀

 

FANG FA GAI SHU

方 法 概 述

 //  

采用磷酸鹽緩沖液提取試樣中游離的低聚半乳糖和乳糖,,采用半乳糖苷酶將提取液中低聚半乳糖和乳糖酶解,,將提取的初始溶液和酶處理過的溶液分別用離子色譜儀測(cè)定。第一步測(cè)定初始溶液中游離的半乳糖和乳糖,,第二步測(cè)定從低聚半乳糖和乳糖中釋放出來的半乳糖總量,。利用乳糖和半乳糖的含量計(jì)算試樣中低聚半乳糖的含量。

 

LI ZI SE PU TIAO JIAN

離 子 色 譜 條 件

 //  

由于前處理使用半乳糖苷酶將低聚半乳糖酶解為半乳糖和葡萄糖,因此采用對(duì)單雙糖具有優(yōu)秀分離能力的CarboPac PA20糖分析色譜柱,,氫氧化鈉和醋酸鈉水溶液梯度洗脫,,脈沖安培檢測(cè)器,進(jìn)樣量20μL,,柱溫30℃,,流速0.4 mL/min,金工作電極,,Ag/AgCl參比電極,,糖標(biāo)準(zhǔn)四電位波形進(jìn)行測(cè)定。離子色譜法對(duì)常見單雙糖的分離效果如圖2所示,。僅需5~25 μL小體積進(jìn)樣即可檢測(cè)ng/L~mg/L級(jí)別單雙糖,,無需衍生化,靈敏度高,。

△IC-PAD測(cè)定常見單雙糖(點(diǎn)擊查看大圖)

1-巖藻糖,;2-鼠李糖;3-阿拉伯糖,;4-半乳糖,;5-葡萄糖;6-蔗糖,;7-木糖,;8-果糖;9-乳糖

 

2

乳粉中的低聚半乳糖

Galacto-oligosaccharides in milk powder

嬰幼兒奶粉中都添加了低聚半乳糖的營養(yǎng)成分,,因此是奶粉中的必檢項(xiàng)目。關(guān)于奶粉中低聚半乳糖的測(cè)定目前尚無國家標(biāo)準(zhǔn)出臺(tái),。

 

賽默飛自主研發(fā)建立使用低聚半乳糖原料為對(duì)照品直接測(cè)定奶粉中低聚半乳糖的方法,。利用不受奶粉本底干擾的色譜峰來定性定量,不受樣品中高含量乳糖的干擾,,可準(zhǔn)確測(cè)定嬰幼兒奶粉中的低聚半乳糖,。此方法無需酶解,降低成本,,但對(duì)色譜柱分離能力和檢測(cè)器靈敏度要求較高,,賽默飛ICS-6000高壓離子色譜儀,配置脈沖安培檢測(cè)器和Carbopac PA20色譜柱,,可wan全滿足高靈敏度和分離度的要求,。

△IC-PAD測(cè)定不同廠家的低聚半乳糖譜圖(點(diǎn)擊查看大圖)

 

#采用離子色譜法(IC)進(jìn)行低聚半乳糖的檢測(cè)具有多種優(yōu)勢(shì):

1.專用糖分析色譜柱對(duì)糖類物質(zhì)具有良好的保留和分離效果;

2.脈沖安培檢測(cè)器(PAD)對(duì)糖類物質(zhì)具有特異性響應(yīng)和高靈敏度,;

3.無需衍生即可直接檢測(cè),,重復(fù)性好;

4.單雙糖、低聚糖,、多聚糖,、糖醇、氨基糖,、酸性糖均可進(jìn)行檢測(cè),。

離子色譜測(cè)定糖類物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)方法和推薦色譜柱持續(xù)更新中!??!

(△點(diǎn)擊查看大圖)

 

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