戴安液相使用時,,你犯過這些錯誤沒,?
戴安液相對于多數(shù)人來說都是很好上手的儀器了,但是就算是用過幾年,、經(jīng)驗豐富的分析員都會習慣于一些錯誤的操作,,經(jīng)常導致一些儀器故障,。方便快捷的分析過程固然重要,但是為了多做樣品而忽略了一些*的步驟,,往往得不償失,,哪些操作不能做?哪些懶兒不能偷,?那些小概率的故障師傅沒教怎么辦,?液相使用過程中有哪四大關(guān)鍵因素要注意?
流動相不過濾
因為塵?;蚱渌魏坞s質(zhì)微粒都會磨損柱塞,、密封環(huán)、缸體和單向閥,,因此應預先除去流動相中的任何固體微粒,。流動相在玻璃容器內(nèi)蒸餾,而常用的方法是濾過,,可采用Millipore濾膜(0.2靘或0.45靘)等濾器,。泵的入口都應連接砂濾棒(或片)。輸液泵的濾器應經(jīng)常清洗或更換,。
戴安液相使用后沒有及時清洗泵
流動相不應含有任何腐蝕性物質(zhì),,含有緩沖液的流動相不應保留在泵內(nèi),尤其是在停泵過夜或更長時間的情況下,。如果將含緩沖液的流動相留在泵內(nèi),,由于蒸發(fā)或泄漏,甚至只是由于溶液的靜置,,就可能析出鹽的微細晶體,,這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環(huán)和柱塞等。
因此,,必須泵入純水將泵充分清洗后,,再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相,可以是甲醇或甲醇-水),。
流動相走空
泵工作時要留心防止溶劑瓶內(nèi)的流動相被用完,,戴安液相否則空泵運轉(zhuǎn)也會磨損柱塞、缸體或密封環(huán),,zui終產(chǎn)生漏液,。
沒有流動相流出,又無壓力指示怎么辦,?
可能是泵內(nèi)有大量氣體,,這時可打開泄壓閥,使泵在較大流量(如5ml/min)下運轉(zhuǎn),,將氣泡排盡,,也可用一個50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體,。另一個可能原因是密封環(huán)磨損,需更換,。
戴安液相壓力和流量不穩(wěn)了,?
原因可能是氣泡,需要排除,;或者是單向閥內(nèi)有異物,,可卸下單向閥,浸入丙酮內(nèi)超聲清洗,。有時可能是砂濾棒內(nèi)有氣泡,,或被鹽的微細晶粒或滋生的微生物部分堵塞,,這時,,可卸下砂濾棒浸入流動相內(nèi)超聲除氣泡,或?qū)⑸盀V棒浸入稀酸(如4mol/L硝酸)內(nèi)迅速除去微生物,,或?qū)Ⅺ}溶解,,再立即清洗。
壓力為啥過高或過低,?
戴安液相可能是是管路被堵塞,,需要清除和清洗。壓力降低的原因則可能是管路有泄漏,。檢查堵塞或泄漏時應逐段進行,。
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