肝酯酶（Hepatic lipase,，HL）試劑盒說明書

分光光度法 50 管/24 樣

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

肝酯酶是脂肪分解酶,，在肝實質(zhì)細胞中合成，存在于肝臟竇周間隙內(nèi)皮細胞表面和竇周間隙腔面的肝細胞微絨毛表面,，可促進脂蛋白中的膽gu醇向類固醇激素轉(zhuǎn)化,，血漿中的HL 活性增高時，血漿中小顆粒可導致LDL 水平升高,，加速動脈粥樣硬化的發(fā)生,。

測定原理：

肝酯酶水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生α-萘酚，可與固藍 B 鹽形成紫紅色偶氮化合物,，在 595nm 有特征吸收峰,，顏色深淺在一定范圍內(nèi)與肝酯酶活性成正相關(guān)。

肝酶試劑盒  脂肪酸系列-常備現(xiàn)貨

組成：

自備儀器和用品：

天平、冷凍離心機、研缽,、水浴鍋,、可見分光光度計、1 ml 玻璃比色皿,。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

樣品處理:

1. 組織：按照質(zhì)量（g）：試劑一體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入 1ml 試劑一）加入試劑一，冰浴勻漿后于 4℃,，10000g 離心 10min，取上清待測,。

2. 細胞：按照細胞數(shù)量（10⁴ 個）：試劑一體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1ml試劑一）加入試劑一,，冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒,，間隔 7 秒,，總時間 3min）；然后于 4℃,，10000g 離心 10min,，取上清待測。

3. 血清：直接測定,。

測定操作:

計算公式:

標準曲線：y= 0.1519 x -0.1241,，R²=0.9994

1. 按照蛋白濃度計算

酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生 1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。 HL 活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.1241）÷0.1519×V 反總÷（V 樣×Cpr）÷T

= 6.58×（△A+0.1241）÷Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計算

酶活性定義：每克組織每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生 1μmol α-萘酚為一個酶活力單位,。

HL 活性（μmol /min /g 鮮重）= （△A+0.1241）÷0.1519×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）÷T

= 6.58×（△A+0.1241）÷W

3. 按照細胞數(shù)量計算

酶活性定義：每 10⁴ 個細胞每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生 1μmol α-萘酚為一個酶活力單位,。

HL 活性（μmol /min /10⁴ cell）= （△A+0.1241）÷0.1519×V 反總÷（V 樣×細胞數(shù)量÷V 樣總）÷T

= 6.58×（△A+0.1241）÷細胞數(shù)量

4. 按照液體體積計算

酶活性定義：每毫升血清每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生 1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。HL 活性（μmol /min

/ml）=（△A+0.1241）÷0.1519×V 反總÷V 樣÷T

= 6.58×（△A+0.1241）

V 反總：反應總體積,，1ml,；V 樣：反應體系中加入樣本體積，0.1ml,；W：樣本質(zhì)量,，g；V 樣總：加入提取液體積,，1ml,；T：反應時間，10min

肝酶試劑盒  脂肪酸系列-常備現(xiàn)貨