蔗糖（sucrose）含量試劑盒說明書

微量法 100 管/96 樣

正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：

蔗糖是植物光合作用的主要產(chǎn)物，也是糖分運(yùn)輸和儲(chǔ)藏的主要形式,。因此,，測定蔗糖含量對于植物糖代謝具有重要意義。此外,，蔗糖含量是飲料﹑蜂蜜,、果脯﹑糖果和乳制品等產(chǎn)品質(zhì)量控制的重要指標(biāo)之一。

測定原理：

先用堿與樣品共熱,，破壞其中的還原糖,。然后在酸性條件下將蔗糖水解生成葡萄糖和果糖，果糖進(jìn)一步與間苯er酚反應(yīng),，生成有色物質(zhì),，在 480nm 下有特征吸收峰。

蔗糖（sucrose）含量試劑盒   淀粉系列

組成：

自備儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、水浴鍋,、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板和蒸餾水,。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

蔗糖提?。?/span>

稱取 0.1~0.2g 樣本，常溫研碎,，加入 0.5ml 提取液,，適當(dāng)研磨后快速轉(zhuǎn)移到離心管中，置于 80℃水浴鍋中 10min,，振蕩 3~5 次,，冷卻后,，4000g，常溫離心 10min,，取上清,，加入 2mg 試劑五，80℃脫色 30min,，再加入 0.5ml 提取液,，冷卻后，4000g,，常溫離心 10min,，取上清液測定。

測定步驟：

1,、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,，調(diào)節(jié)波長至 480nm，蒸餾水調(diào)零,。

2,、樣本測定，（在EP 管中依次加入下列試劑）：

混勻,，沸水浴煮沸 5min 左右（蓋緊,，防止水分散失）

混勻，沸水浴 30min,，冷卻后取 200μl 至微量石英比色皿或 96 孔板中測定 480nm 處光吸收值,，空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測定管分別記為A1,、A2 和A3,。空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只要做一管,。

蔗糖含量計(jì)算：

1,、按照蛋白質(zhì)含量計(jì)算

蔗糖含量(mg/mg prot)=(C 標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷（V1×Cpr）= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr

此法需要自行測定蛋白濃度。

2,、按照樣品質(zhì)量計(jì)算

蔗糖含量(mg/g 鮮重)=(C 標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=(A3-A1)÷(A2-A1)÷W,。

C 標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，1mg/ml,；V1：加入樣本體積,，0.025ml；V2：加入提取液體積,，1ml,； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml,；W：樣本鮮重,，g,。

注意：zui低檢測限為 100ng/g 鮮重或 1ng/mg prot

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