總糖含量試劑盒說明書

分光光度法 50 管/48 樣

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：

糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一，也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì),?？偺且部煞Q為碳水化合物，包括可溶性的單糖,，二糖以及不溶性的淀粉,，纖維素，幾丁質(zhì)等,。

測定原理：

總糖酸水解為還原糖,，在 NaOH 和丙三醇存在下，DNS 試劑與還原糖共熱后被還原成氨基化合物,，在過量的NaOH 堿性溶液中呈桔紅色，在 540nm 處有最大吸收峰,，以此測定樣品中的總糖含量,。

總糖含量試劑盒   糖代謝系列-常備現(xiàn)貨

組成：

自備儀器和用品：

可見分光光度計、沸水浴、可調(diào)式移液器,、1ml 玻璃比色皿,、研缽、蒸餾水,。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

樣品中總糖的提?。?/span>

組織：稱取約 0.1g 樣品，加入 1ml 試劑一,，1.5ml 蒸餾水,，勻漿，95℃水浴中加熱 30min,，加入 1ml試劑二,，混勻，用蒸餾水定容至 10ml,，8000g 25℃離心 10min,，取上清液待測。（注意稀釋,，見注意事項）液體樣本：取 0.1ml 樣本,，加入 1ml 試劑一，1.5ml 蒸餾水,，勻漿,，95℃水浴中加熱 30min，加入 1ml 試 劑二,，8000g 25℃離心 10min,，取上清液待測。（注意稀釋,，見注意事項）

測定步驟：

1,、分光光度計預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 540nm,，蒸餾水調(diào)零,。

2、調(diào)節(jié)水浴鍋至 95 度,。

3,、加樣表：

混勻，置 95 度水浴中 10min（蓋緊,，以防止水分散失）,，冷卻至室溫

混勻，540nm 測定吸光值,，ΔA=A 測定管-A 空白管

注意：1,、空白管只要做一管,。

2、如果ΔA 大于 2,，需要將上清液用蒸餾水稀釋,，計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

總糖含量計算：

1,、標準條件下測定的回歸方程為 y = 0.4503x - 0.0507,；x 為標準品濃度（mg/ml），y 為吸光值,。

2,、按樣本鮮重計算：

總糖（mg /g 鮮重）= [(ΔA＋0.0507) ÷0.4503×V1]÷（W×V1÷V2）×稀釋倍數(shù)=22.207×(ΔA＋0.0507) ÷W×稀釋倍數(shù)。

3,、按樣本蛋白濃度計算：

總糖（mg /mg prot）=[(ΔA＋0.0507) ÷0.4503×V1]÷(V1×Cpr) ×稀釋倍數(shù)=2.2207×(ΔA＋0.0507) ÷Cpr×稀釋倍數(shù),。

4、按照液體體積計算：

總糖（mg /ml）=[(ΔA＋0.0507) ÷0.4503×V1]÷（V3×V1÷V2）×稀釋倍數(shù)=77.73×(ΔA＋0.0507)×稀釋倍數(shù),。 V1：加入樣本體積,，0.04ml；V2：加入提取液體積,，10ml/3.5ml,； V3:液體樣本，0.1ml,； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/ml；W：樣本鮮重,，g,。

注意：zui低檢測限為 1mg/g 鮮重或 10ng/mg prot

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