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如何使用反向移液技術(shù)更精準(zhǔn)的移取蛋白溶液

閱讀:41      發(fā)布時(shí)間:2024-11-20
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每支移液器的液程通常都用純水和正向移液技術(shù)校準(zhǔn)過(guò)。因此我們推薦使用正向移液技術(shù)移取水性溶液,,如緩沖液,,稀釋酸或堿。當(dāng)移取不同于水的液體時(shí),,由于具有不同的液體特性,其移液量可能偏離所選的量程,。比如一些生物溶液的移液,,可能會(huì)在移液器或試管中產(chǎn)生氣泡或泡沫,這將使移液量產(chǎn)生偏差,。在這種情況下,,我們推薦使用反向移液技術(shù)移取高粘度或者容易產(chǎn)生泡沫的液體。反向移液技術(shù)減少了噴濺,,泡沫和氣泡形成,。這種方法尤其適用于移取小體積的液體,。

下面先介紹一下正向移液和反向移液技術(shù)的操作。


  1. 將按鈕壓至停點(diǎn),。
  2. 將吸頭浸入液面下1cm處,,緩慢釋放按鈕使其滑回原位。將吸頭從液體中移出,,接觸容器邊緣除去多余的液體,。
  3. 排液時(shí),吸頭緊貼容器壁先輕按按鈕至停點(diǎn),,略作停頓后,,將按鈕按至第二停點(diǎn)(這個(gè)操作會(huì)將吸頭內(nèi)的液體排盡),將吸頭從容器中沿容器壁移出,。
  4. 松開(kāi)按鈕至準(zhǔn)備位置,。

 
  1. 將按鈕壓至第二停點(diǎn)。
  2. 將吸頭浸入液面1cm處,,緩慢釋放按鈕使其滑回原位,。這將時(shí)液體充滿(mǎn)吸頭。將吸頭從液體中取出,,接觸容器邊緣去掉多余液體,。
  3. 放液到接收容器時(shí)平穩(wěn)地輕按按鈕至停點(diǎn)。保持在這個(gè)位置,。一些液體會(huì)殘留在吸頭中不能被放出,。
  4. 殘留在吸頭內(nèi)的液體能夠被吹回原溶劑中或者同吸頭一起丟棄。
  5. 松開(kāi)按鈕到準(zhǔn)備位置,。


 
         選擇合適的移液器對(duì)于微量移液的精準(zhǔn)性也很重要,,Thermo Scientific F系列移液器的吹出設(shè)計(jì)則滿(mǎn)足了微量移液對(duì)精準(zhǔn)性的需求。低于50μl液程的Thermo F系列移液器均采用雙活塞設(shè)計(jì),,與其它普通移液器相比,,其空氣吹出能力增大50%-60%,因此在小體積的液體吹出時(shí)會(huì)非常干凈,,大大提高了移液的精準(zhǔn)性,。
 
 
        我們使用Thermo Scientific Finnpipette F2 1-10 μl移液器,配合Thermo Scientific Finntip Flex 10吸頭,,同時(shí)分別使用正向移液和反向移液,,移取1%牛血清白蛋白(BSA,Sigma A7030)進(jìn)行移液精準(zhǔn)性測(cè)試,。
 
 圖1 表明當(dāng)使用反向移液技術(shù)時(shí),,移液量的變化比使用正向移液技術(shù)處于更狹窄的一個(gè)范圍。


 圖2 表明使用兩種移液方式的不精確度。不精確度是估量移液的重復(fù)性的,。反向移液技術(shù)可以使不精確度相對(duì)于正向移液技術(shù)降低50%,。
 
       這是因?yàn)椋珺SA溶液含有易被疏水移液器吸頭壁吸附的疏水成分,。當(dāng)使用正向移液技術(shù)時(shí),,每次移液后少量的液體易殘留在吸頭中。這種趨勢(shì)會(huì)增加吹出液體體積之間的偏差,,因?yàn)楫?dāng)重復(fù)移液時(shí)吸頭中累積的殘余液體可能增加下一次移液的移液量,。而反向移液技術(shù)中有額外的液體被吸入吸頭中,這些額外的液體作用似一個(gè)蓄水池它使連續(xù)移液的移液量均等,。這個(gè)蓄水池也能阻止空氣在吹出液體的最后從吸頭口進(jìn)入,,這樣可以降低液體起泡的可能性。這使反向移液技術(shù)在移取小液量液體時(shí)尤其有用,。由此可見(jiàn),,選擇Thermo Scientific F2移液器,同時(shí)配合反向移液技術(shù),,可較好的提高移取蛋白溶液的精確度和重復(fù)性,。
 
      這是個(gè)移液器的王國(guó),每個(gè)人都能找到自己的移液器,。這是一個(gè)富于創(chuàng)新的品牌,,傳承40年移液器的深厚底蘊(yùn)?!跋蠕h源于創(chuàng)新,,全新精準(zhǔn)體驗(yàn)"是賽默飛世爾科技移液器的真實(shí)寫(xiě)照。Thermo Scientific Finnpipette的歷史可追溯到1971年,,憑借著以人為本的設(shè)計(jì)理念,,堅(jiān)持不斷創(chuàng)新,締造了許許多多世界“"的記錄,。我們推出了一支連續(xù)可調(diào)微量移液器,、支多道移液器、支可整支高壓消毒的移液器,、支彩色標(biāo)記移液器,。Finnpipette特別重視客戶(hù)反饋,不斷努力改善產(chǎn)品,。我們始終追求提高性能,、精準(zhǔn)性和客戶(hù)滿(mǎn)意度。更多Thermo Scientific移液解決方案請(qǐng)查看:Thermo移液器,。



 

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