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分子克隆實驗的流程及注意事項--三,、同源重組2025/3/19
本方法適用于總長度（載體+所有片段）不超過20kb的重組實驗,。目的片段引物設(shè)計與PCR擴增1.2.1.引物同源臂設(shè)計要求：15-20bp(不計算酶切位點),，GC含量40%-60%；根據(jù)實驗需求選擇對應(yīng)...
分子克隆實驗的流程及注意事項--二,、TOPO克隆2025/3/18
二、TOPO克隆引物設(shè)計與PCR擴增1.目的片段PCR擴增引物合成時,，要求引物5’端不可磷酸化修飾,；2.建議使用高保真酶進行目的片段的PCR擴增，并摸索退火溫度,，優(yōu)化反應(yīng)體系和程序,。PCR產(chǎn)物的純化回...
分子克隆實驗的流程及注意事項--一,、酶切連接2025/3/17
一,、酶切連接一般來說，限制性內(nèi)切酶的選擇非常重要,。建議從以下方面判斷選擇：1.限制性內(nèi)切酶的識別序列在目的載體中存在且只有一個，在目的片段中不存在,；2.盡量選擇酶切產(chǎn)物為粘性末端,、酶切效率高的限制性內(nèi)...
分子克隆實驗解決方案-第一章：分子克隆實驗概述2025/3/14
第一章：分子克隆實驗概述分子克隆技術(shù)是目前實驗室常用的實驗技術(shù)之一，研究者運用該技術(shù)能夠?qū)NA片段以體外重組的方式構(gòu)建至載體,，研究者運用該技術(shù)能夠?qū)NA片段以體外重組的方式構(gòu)建至載體,，隨后通過轉(zhuǎn)化...
實時熒光定量 PCR 的結(jié)果分析--實時熒光定量 PCR 常用名詞2025/3/10
校正染料(ROX)校正加樣誤差或孔與孔之間的誤差，提供一個穩(wěn)定的基線,，極大地改進定量的精確度,，提高重復管之間的數(shù)據(jù)重現(xiàn)性。注意：不同的儀器對ROX的需求不同,?；€PCR的最初幾個循環(huán)，在此基線上熒光信...
實時熒光定量PCR應(yīng)用及結(jié)果分析--相對定量和絕對定量2025/3/7
第三章：實時熒光定量PCR的應(yīng)用一,、相對定量測定不同樣品中基因表達量的相對值,。內(nèi)參基因的選擇(1)始終選擇表達充沛、均一的基因做為內(nèi)參基因；(2)不要盲目選擇常用的內(nèi)參基因,；(3)常用內(nèi)參基因：GAP...
實時熒光定量 PCR 操作流程及注意事項---FAQ2025/3/4
FAQ總RNA提取-酚氯仿抽提法RNA降解組織樣本保存不當,。RNA提取時需選擇新鮮組織或細胞樣本，若為凍存樣本,，盡量避免反復凍融,。樣品離開活體或原來的生長環(huán)境后，樣品中的內(nèi)源RNase開始降解RNA,，...
實時熒光定量 PCR 操作流程及注意事項---實時熒光定量 PCR2025/2/28
實時熒光定量PCR操作流程概要基于SYBR染料法的qPCR反應(yīng)體系以Vazyme產(chǎn)品ChamQTMUniversalSYBR®qPCRMasterMix(Vazyme#Q711)為例組分自備材...
實時熒光定量 PCR 操作流程及注意事項--逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)2025/2/27
操作流程概要基于后期為qPCR的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系以Vazyme產(chǎn)品HiScript®IIIRTSuperMixforqPCR(+gDNAwiper)(Vazyme#R323)為例自備材料RNas...
實時熒光定量 PCR 操作流程及注意事項--RNA模板的制備2025/2/26
一,、RNA模板的制備常見的RNA提取的方法：傳統(tǒng)的酚CHCl?抽提法和柱式抽提法。操作流程概要酚CHCl?抽提法以Vazyme產(chǎn)品RNAisolaterTotalRNAExtractionReagen...
實時熒光定量PCR總述2025/2/10
第一章：實時熒光定量PCR總述一,、實時熒光定量PCR的概念實時熒光定量PCR即Real-timePCR,，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過CT值和標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。二...
提取純化產(chǎn)品冊---09 樣本快速裂解（P073）2025/2/8
RoomTempTMSampleLysisKit(P073)室溫裂解試劑盒(P073)--保存條件:2~8℃保存●操作簡捷室溫3min即可,，無需復雜模板提取●裂解效率高裂解試劑與傳統(tǒng)試劑盒提取基因組效...
提取純化產(chǎn)品冊---08 外泌體（R603）2025/2/8
VEX®ExosomeIsolationReagent(fromplasma)血漿外泌體提取試劑(R603)●操作簡單快捷無需超高速離心機，一步沉淀●兼容低量樣本起始樣本血漿量可低至500μl...
提取純化產(chǎn)品冊---08 外泌體（R602）2025/2/6
VEX®ExosomeIsolationReagent(fromserum)血清外泌體提取試劑(R602)---保存條件:保存于2℃-8℃●操作簡單快捷無需超高速離心機,，一步沉淀●兼容低量樣本...
提取純化產(chǎn)品冊---08 外泌體（R601）2025/2/5
VEX®ExosomeIsolationReagent(fromcellculturemedia)細胞培養(yǎng)液上清外泌體提取試劑(R601)---保存條件:2℃-8℃保存●操作簡單快捷無需超高速...
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