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Tamoxifen誘導(dǎo)Cre-ERT2小鼠 使用指南2024/6/20
Cre-ERT2小鼠是一類含有雌激素受體的配體結(jié)合區(qū)突變體（ERT）與cre重組酶的融合蛋白表達的小鼠,。Cre-ERT2在無Tamoxifen誘導(dǎo)的情況下，在細胞質(zhì)內(nèi)處于無活性狀態(tài)；當(dāng)Tamoxife...
熱激轉(zhuǎn)化大腸桿菌的原理2024/6/20
鈣離子使得DNA沉淀于細胞表面,，在熱激使得細胞膜出現(xiàn)間隙后,，進入胞內(nèi)，實現(xiàn)轉(zhuǎn)化的目的,。這個過程主要分2步：1.低溫,、低滲的鈣離子溶液，能使得大腸桿菌細胞膨脹,；鈣離子使得細胞膜通透性改變,，容易粘附外源D...
WB實驗詳細步驟及用到的相關(guān)試劑匯總2024/6/17
以下是WB實驗的詳細步驟及相關(guān)試劑耗材匯總：一、實驗步驟1.蛋白提?。菏褂眠m當(dāng)?shù)牧呀庖禾崛〉鞍住?.蛋白定量：采用Bradford法或BCA法等測定蛋白濃度,。3.SDS-PAGE電泳：配制分離膠和濃縮...
假陽性,？條帶不對？菌液PCR問題一網(wǎng)打盡2024/6/13
1.平板長菌,，但挑的單克隆菌落搖不起來,？產(chǎn)生原因及解決辦法：（1）挑取的單克隆為雜菌，呈假陽性,。出現(xiàn)這種情況的原因包括：①配制平板過程中,，加入抗生素時溫度過高致使抗生素滅活；②配制平板過程中,，抗生素濃...
睡眠：一個被忽視的公共衛(wèi)生問題2024/6/12
《柳葉刀-糖尿病與內(nèi)分泌學(xué)》（TheLancetDiabetes&Endocrinology）發(fā)表社論指出,，對于18歲及以上的成年人，每天建議的睡眠時間為7-9小時,，但實時經(jīng)濟,、現(xiàn)代生活方式,、工作壓力...
細胞培養(yǎng)實驗步驟詳解2024/6/12
以下是細胞培養(yǎng)實驗常見的步驟及用到的產(chǎn)品：步驟：1.準(zhǔn)備工作：超凈工作臺消毒；-用到的產(chǎn)品：75%酒精等,；2.培養(yǎng)基配制：將基礎(chǔ)培養(yǎng)基與血清等添加物混合,；-用到的產(chǎn)品：基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如DMEM、RPMI...
提高效率與質(zhì)量的實用技巧2024/6/12
1,、提高實驗的效率1）實驗前有計劃安排,、預(yù)備方案或者“車輪戰(zhàn)”（細胞實驗）一般從基礎(chǔ)的培養(yǎng)細胞開始，開始實驗時,，實驗方法一般來自于實驗室或者文獻中條件優(yōu)化以及自我推測及驗證,，因此做實驗之前預(yù)想實驗方案...
細胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的操作步驟及經(jīng)驗分享2024/6/12
細胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是一種常用的基因傳遞技術(shù)，其中慢病毒轉(zhuǎn)染作為一種有效的手段被廣泛采用,。通過慢病毒載體,，可將目的基因序列穩(wěn)定地整合到宿主細胞基因中，實現(xiàn)長期穩(wěn)定的表達,。這種轉(zhuǎn)染方法不僅能夠在多種細胞系中高效...
不止助眠！我國學(xué)者發(fā)現(xiàn)褪黑素還能延緩腎臟衰老2024/6/11
研究人員發(fā)現(xiàn),，褪黑激素在維持線粒體穩(wěn)態(tài)中起著至關(guān)重要的作用,。p53、p21,、p16和SASP的表達上調(diào)是細胞衰老的標(biāo)志，與對照(Ctrl)組相比,，阿特拉津組p53,、磷酸化p53(p-p53)、p21和...
免疫組化實驗詳細步驟匯總2024/6/11
步驟：1.切片準(zhǔn)備：將組織進行石蠟包埋,，切成薄片并貼附于載玻片上,。-用到的產(chǎn)品：載玻片等。2.烤片：將切片放入烤箱中適當(dāng)溫度烤片,，使切片緊密貼附,。3.脫蠟：依次使用二甲苯等進行脫蠟處理。-用到的產(chǎn)品：...
提取基因組,，細胞裂解是用物理方法,、化學(xué)法還是酶解法？2024/6/6
提取基因組,，細胞裂解是用物理方法,、化學(xué)法還是酶解法,？物理方法化學(xué)方法大部分用化學(xué)法，但也有可能搭配使用,。細胞裂解的物理放方法指的是機械破碎,，如勻漿法、研磨法,、超聲波處理法,，還有反復(fù)凍融的方法。酶解法是...
慢病毒制備和導(dǎo)入細胞的操作步驟及注意事項2024/6/6
前置知識通過病毒介導(dǎo)將核酸導(dǎo)入哺乳動物細胞是一種常用的實驗技術(shù),，被廣泛用于基因傳遞,、基因表達和功能研究等領(lǐng)域。這個實驗通常分為以下6個部分：1.選擇適當(dāng)?shù)牟《据d體：常用的病毒載體包括腺病毒（Adeno...
什么是基因編輯技術(shù),？（下）2024/6/5
四、轉(zhuǎn)錄激活樣效應(yīng)因子核酸酶技術(shù)（TALEN）轉(zhuǎn)錄激活樣效應(yīng)（TranscriptionActivator-LikeEffector,TALE）核酸酶（Nucleases,TALENs）是一種基因編輯...
什么是基因編輯技術(shù),？（上）2024/6/5
一、前言每一個生命個體都是由無數(shù)精妙的生物分子共同組成的,。而其中的DNA就像是生命的藍圖,，DNA中的每一段特定序列，即我們所稱的基因,，各自承擔(dān)著特定的生物學(xué)功能,。它們共同調(diào)控著生物體的生長、發(fā)育,、繁殖...
石蠟切片HE染色實驗2024/6/4
蘇木精-伊紅染色法(Hematoxylin-Eosinstaining),，簡稱HE染色法，切片技術(shù)里常用的染色法之一,。蘇木精染液為堿性,，主要使用細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖著紫藍色；伊紅為酸性染料,，...
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